Обмен углеводов

Обычно моносахариды имеют тривиальные названия: глюкоза, галактоза, рибоза, ксилоза и др. К этой же группе соединений относятся различные производные моносахаридов, важнейшими из них являются фосфорные эфиры моносахаридов [ глюкозо-6-фосфат, фруктозо-1,6-бисфосфат, рибозо-5-фосфат и др.], уроновые кислоты [галактуроновая, глюкуроновая, идуроновая и др.], аминосахара [глюкозамин, галактозамин и др.], сульфатированные производные уроновых кислот, ацетилированные производные аминосахаров и др.Общее количество мономеров и их производных составляет несколько десятков соединений, что не уступает имеющемуся в организме количеству индивидуальных аминокислот. 1.1.2. Олигосахариды, представляющие собой полимеры, мономерными единицами которых являются моносахариды или их производные. Число отдельных мономерных блоков в полимере может достигать полутора или двух / не более / десятков. Все мономерные единицы в полимере связаны гликозидными связями.

Олигосахариды в свою очередь делятся на гомоолигосахариды, состоящие из одинако- - 2 - вых мономерных блоков [ мальтоза ] , и гетероолигосахариды - в их состав входят различные мономерные единицы [ лактоза ]. В большинстве своем олигосахариды встречаются в организме в качестве структурных компонентов более сложных молекул - гликолипидов или гликопротеидов. В свободном виде в организме человека могут быть обнаружены мальтоза, причем мальтоза является промежуточным продуктом расщепления гликогена, и лактоза, входящая в качестве резервного углевода в молоко кормящих женщин.

Основную массу олигосахаридов в организме человека составляют гетероолигосахариды гликолипидов и гликопротеидов. Они имеют чрезвычайно разнообразную структуру, обусловленную как разнообразием входящих в них мономерных единиц, так и разнообразием вариантов гликозидных связей между мономерами в олигомере [ a - и b -гликозидные связи; связи, соединяющие различные атомы углерода в соседних мономерных единицах: a - 1,4, a - 1,3, a - 1,6 и др. ]. 1.1.3. Полисахариды, представляющие собой полимеры, построенные из моносахаридов или их производных, соединенных между собой гликозидными связями, с числом мономерных единиц от нескольких десятков до нескольких десятков тысяч. Эти полисахариды могут состоять из одинаковых мономерных единиц, т.е. являться гомополисахаридами, или же в их состав могут входить различные мономерные единицы - тогда мы имеем дело с гетерополисахаридами.

Единственным гомополисахаридом в организме человека является гликоген, состоящий из остатков a -D - глюкозы. Более разнообразен набор гетерополисахаридов - в организме присутствуют гиалуроновая кислота, хондроитинсульфаты, кератансульфат, дерматансульфат, гепарансульфат и гепарин.

Каждый из перечисленных гетерополисахаридов состоит из индивидуального набора мономерных единиц.Так основными мономерными единицами гиалуроновой кислоты являются глюкуроновая кислота и N-ацетилглюкозамин,тогда как в состав гепарина входят сульфатированный глюкозамин и сульфатированная идуроновая кислота. 1.2. Функции углеводов различных классов Функции углеводов в организме разнообразны и, естественно, различны для разных классов соединений.

Моносахариды и их производные выполняют, во-первых, энергетическую функцию: окислительное расщепление этих соединений дает организму 55-60 % необходи- - 3 - мой ему энергии4. Во-вторых, промежуточные продукты распада моносахаридов и их производных используются в клетках для синтеза других необходимых клетке веществ, в том числе соединений других классов; так, из промежуточных продуктов метаболизма глюкозы в клетках могут синтезироваться липиды и заменимые аминокислоты, правда, в последнем случае необходим дополнительный источник атомов азота аминогрупп. В третьих, моносахариды и их производные выполняют структурную функцию, являясь мономерными единицами других, более сложных молекул, таких как полисахариды или нуклеотиды.

Главной функцией гетероолигосахаридов является структурная функция - они являются структурными компонентами гликопротеидов и гликолипидов. В этом качестве гетероолигосахариды участвуют в реализации гликопротеидами целого ряда функций: регуляторной [ гормоны гипофиза тиротропин и гонадотропины - гликопротеиды ],коммуникативной [ рецепторы клеток - гликопротеины ], защитной [ антитела - гликопротеины ]. Кроме того, гетероолигосахаридные блоки, входя в состав гликолипидов и гликопротеидов, участвуют в формировании клеточных мембран, образуя, например, такой важный элемент клеточной структуры как гликокалликс.

Гликоген - единственный гомополисахарид, имеющийся в организме животных - выполняет резервную функцию. причем он является резервом не только энергетическим, но также и резервом пластического материала.

Гликоген в том или ином количестве присутствует практически во все клетках человеческого организма.

Запасы гликогена в печени могут составлять до 3-5 % от сырой массы этого органа [ порой до 10 % ], а его содержание в мышцах - до 1% общей массы ткани.

Учитывая массу этих органов, общее количество гликогена в печени может составлять 150 - 200 г , а запасы гликогена в мыщцах - до 600 г . Гетерополисахариды выполняют в организме структурную функцию - они входят в состав глизаминопротеогликанов; последние,наряду с структурными белками типа коллагена или эластина, формируют межклеточное вещество различных органов и тканей.

Гликозаминопротеоггликановые агрегаты, имея сетчатую структуру, выполняют функцию молекулярных фильтров, препятствующих или сильно тормозящих движение макромолекул в межклеточной среде. Кроме того, молекулы ге- - 4 - терополисахаридов имеют в своей структуре множество полярных и несущих отрицательный заряд группировок, за счет которых они могут связывать большое количество воды и катионов, выполняя роль своеобразных депо для этих молекул.

Функции некоторых углеводов, имеющихся в организме, весьма специфичны. Так, гепарин является естественным антикоагулянтом - он препятствует свертыванию крови в сосудах, а лактоза, о чем уже упоминалось, является резервным углеводом женского молока. 2. Усвоение экзогенных углеводов В обычных условиях основным источником углеводов для человека являются углеводы пищи.

Суточная потребность в углеводах составляет примерно 400 г , причем крайне желательно. чтобы легко усвояемые углеводы [ глюкоза, сахароза, лактоза и пр.] составляли не более 25 % их общего количества в пищевом рационе. В процессе усвоения пищи все экзогенные полимеры углеводной природы расщепляются до мономеров, что лишает эти полимеры видовой специфичности, а во внутреннюю среду организма из кишечника поступают лишь моносахариды и их производные; в дальнейшем эти мономеры используются по мере необходимости для синтеза специфичных для человека олигоили полисахаридов.

Расщепление крахмала или гликогена пищи начинается уже в ротовой полости за счет воздействия на эти гомополисахариды амилазы и мальтазы слюны, однако этот процесс не имеет существенного значения, поскольку пища в ротовой полости находится очень короткое время. В желудке при пищеварении среда кислая и амилаза слюны,попадающая в желудок вместе с пищевым комком, практически не работает.

Основная масса крахмала и гликогена пищи расщепляется в тонком кишечнике под действием амилазы поджелудочной железы до дисахаридов мальтозы и изомальтозы.

Образовавшиеся дисахариды расщепляются до глюкозы при участии ферментов, секретируемых стенкой кишечника: мальтазы и изомальтазы.

Мальтаза катализирует гидролиз a -1,4-гликозидных связей, а изомальтаза - гидролиз a -1,6-гликозидных связей.

Поступившая с пищей сахароза расщепляется в кишечнике до глюкозы и фруктозы при участии фермента сахаразы, а поступившая лак- - 5 - тоза - до глюкозы и галактозы под действием фермента лактазы. Оба этих фермента секретируются стенкой кишечника.

Процессы расщепления гетероолигосахаридов или гетерополисахаридов мало изучены. По-видимому, стенкой кишечника секретируются гликозидазы, способные расщеплять a - и b - гликозидные связи имеющиеся в этих полимерах.

Всасывание моносахаридов происходит в тонком кишечнике, причем скорости всасывания различных моносахаридов существенно различны. Если скорость всасывания глюкозы принять за 100 , то скорость всасывания галактозы составит 110, фруктозы - 43, маннозы - 19, ксилозы - 15. Принято считать, что всасывание глюкозы и галактозы идет с участием механизмов активного транспорта, всасывание фруктозы и рибозы - по механизму облегченной диффузии, а всасывание маннозы или ксилозы по механизму простой диффузии.

Примерно 90 % всосавшейся глюкозы поступает из энтероцитов непосредственно в кровь, а 10 % ее оказывается в лимфе, впрочем, в дальнейшем и эта глюкоза также оказывается в крови.

Следует отметить, что углеводы могут быть полностью исключены из пищевого рациона. В этом случае все необходимые для организма углеводы будут синтезироваться в клетках из соединений неуглеводный природы в ходе процессов, получивших название глюконеогенез. 3. Пул глюкозы в организме, поступление глюкозы в клетки Преобладающим в количественном отношении моносахаридом, присутствующим во внутренней среде организма, является глюкоза. Ее содержание в крови относительно постоянно и является одной из констант гомеостаза.

Содержание глюкозы в крови составляет 3,3 - 5,5 мМ/л или 80 - 100 мг/дл. Пул глюкозы, т.е. общее содержание свободной глюкозы в организме, составляет величину порядка 20 г. Из них 5 - 5,5 г содержится в крови, остальная глюкоза распределена в клетках и межклеточной жидкости. Из приведенных цифр следует, что концентрация глюкозы в клетках значительно ниже, чем в крови, что создает условия для поступления глюкозы из крови в клетки путем простой или облегченной диффузии. Пул глюкозы в организме есть результат динамического равновесия процессов, обеспечивающих пополнение этого пула и процессов, - 6 - сопровождающихся использованием глюкозы из пула для нужд органов тканей.

Пополнение пула глюкозы идет за счет следующих процессов: а/ поступление глюкозы из кишечника; б/ образование глюкозы из других моносахаридов, например, из галактозы или фруктозы; в/ распад резервного гликогена в печени / гликогенез /; г/ синтез глюкозы из неуглеводных соединений,т.е. глюконеогенез.

Основные направления использования глюкозы из пула: а/ окислительный распад глюкозы / аэробное окисление до СО 2 и Н 2 О, анаэробное окисление до лактата и др./; б/ синтез резервного гликогена; в/ синтез липидов; г/ синтез других моносахаридов или их производных; д/ синтез заменимых аминокислот; е/ синтез других азотсодержащих соединений, необходимых клеткам.

Транспорт глюкозы из крови или межклеточной жидкости в клетки идет по механизму облегченной диффузии, т.е. по градиенту концентрации с участием белка-переносчика.

Эффективность работы механизма этого транспорта в клетках большинства органов и тканей зависит от инсулина.

Инсулин увеличивает проницаемость наружных клеточных мембран для глюкозы, увеличивая количество белка-переносчика за счет дополнительного его поступления из цитозоля в мембраны . Основная масса клеток различных органов и тканей является в этом контексте инсулинзависимыми, однако по крайней мере в клетках трех типов эффективность переноса глюкозы через их наружные мембраны не зависит от инсулина, это эритроциты, гепатоциты и клетки нервной ткани. Эти ткани получили название инсулиннезависимых тканей. но я еще раз хочу подчеркнуть, что речь идет лишь о независимости транспорта глюкозы в эти клетки от инсулина и ни о чем более. Так, доказано, что и клетки мозга и гепатоциты имеют в составе своих наружных мембран рецепторы для инсулина.

Глюкоза, поступившая в клетку, подвергается в клетке единственному превращению - она фосфорилируется с участием АТФ: Глюкоза + АТФ > Глюкозо-6-фосфат + АДФ - 7 - В большинстве органов и тканей ферментом, катализирующим эту реакцию, является гексокиназа . Этот фермент обладает высоким сродством к глюкозе и способен ее фосфорилировать при низких концентрациях глюкозы.В гепатоцитах есть еще один фермент - глюкокиназа , который также может катализировать эту реакцию, но обладая меньшим сродством к глюкозе, он работает лишь в условиях высоких концентраций глюкозы в клетке и обычно принимает участие лишь в процессе синтеза гликогена в печени.

Реакция, катализируемая гексокиназой, сопровождается большой потерей свободной энергии [ D G = - 5 ккал/моль ] и в условиях клетки является необратимой, а глюкозо-6-фосфат представляет собой активированную форму глюкозы.

Существенным является то обстоятельство, что наружная клеточная мембрана непроницаема для гл-6-ф и в результате фосфорилирования глюкоза как бы 'запирается' в клетке. С другой стороны, быстрое превращение глюкозы в гл-6-ф позволяет поддерживать крайне низкую концентрацию глюкозы в клетке, сохраняя тем самым градиент концентрации глюкозы между внеклеточной жидкостью и внутриклеточной средой. 4. Синтез и расщепление гликогена При повышении концентрации глюкозы в крови, например, в результате ее всасывания в кишечнике при пищеварении, увеличивается поступление глюкозы в клетки и по крайней мере часть этой глюкозы может быть использована для синтеза гликогена.

Накопление резерва углеводов в клетках в виде гликогена имеет определенные преимущества перед накоплением глюкозы, так как не сопровождается повышением внутриклеточного осмотического давления.

Вместе с тем, при недостатке глюкозы гликоген легко расщепляется до глюкозы или ее фосфорных эфиров, а образовавшиеся мономерные единицы используются клетками с энергетическими или пластическими целями. 4.1. Синтез гликогена Поступившая в клетки глюкоза подвергается фосфорилированию при участии ферментов гексокиназы или глюкокиназы: - 8 - СН 2 ОН СН 2 ОРО 3 Н 2 АТФ АДФ С О ^ С О НО /Н ОН НО /Н ОН С С > С С НОН Н/Н НОН Н/Н С С С С Н ОН Н ОН Глюкоза Глюкозо-6-фосфат Далее образовавшийся гл-6-ф изомеризуется в гл-1-ф при участии фермента фосфоглюкомутазы [ ФГМ ]: СН 2 ОРО 3 Н 2 СН 2 ОН С О С О НО /Н ОН НО /Н О-РО 3 Н 2 С С > С С НОН Н/Н НОН Н/Н С С С С Н ОН Н ОН Глюкозо-6-фосфат Глюкозо-1-фосфат Затем гл-1-ф взаимодействует с уридинтрифосфатам с образованием УДФ-глюкозы при участии фермента УДФглюкозопирофосфорила - зы [ или глюкозо-1-фосфатуридилтрансферазы ]: СН 2 ОН СН 2 ОН УТФ Ф-Ф С О ^ С О НО /Н О-РО 3 Н 2 НО /Н Н С С > С С НОН Н/Н НОН Н/О - УДФ С С С С Н ОН Н ОН Глюкозо-1-фосфат УДФ - глюкоза Пирофосфат сразу расщепляется на два остатка фосфорной кислоты при участии фермента пирофосфатазы . Эта реакция сопровождается потерей энергии порядка 7 ккал/моль, в результате чего реакция образования УДФ-глюкозы становится необратимой - термодинами- - 9 - ческий контроль направления процесса. На следующем этапе остаток глюкозы из УДФ-глюкозы переносится на синтезирующуюся молекулу гликогена при участии фермента гликогенсинтетазы : УДФ-глюкоза + ( С 6 Н 10 О 5 ) n > ( С 6 Н 10 О 5 ) n+1 + УДФ /гликоген/ и молекула гликогена удлинняется на один остаток глюкозы.

Фермент гликогенсинтетаза способна присоединить остаток глюкозы из УДФглюкозы к строящейся молекуле гликогена только путем образования a -1,4-гликозидной связи.

Следовательно, при участии только одного этого фермента может быть синтезирован лишь линейный полимер.

Гликоген же - полимер разветвленный и имеющиеся в молекуле разветвления формируются с участием другого фермента: амило - 1,4--> 1,6 - гликозилтрансферазы . Этот фермент, называемый иначе ферментом ветвления, переносит фрагмент из 5 - 7 мономерных звеньев с конца линейного участка синтезируемого полисахарида ближе к его средине, причем этот фрагмент присоединяется к полимерной цепи за счет образования a - 1,6-гликозидной связи: | -о-о-о-о-о-о-о о-о-о-о-о-о > -о-о-о-о-о-о-о | a -1,4-связь a -1,6-связь о-о-о-о-о-о Следует заметить, что по другим данным отщепляемый фрагмент, состоящий минимум из 6 глюкозных остатков, переносится на соседнюю цепочку строящегося разветвленного полисахарида. В любом случае в дальнейшем обе цепи удлинняются за счет действия гликогенсинтетазы, а новые разветвления формируются с участием фермента ветвления.

Синтез гликогена идет во всех органах и тканях, однако наибольшее содержание наблюдается в печени [ от 2 до 5-6% общей массы органа ] и в мышцах [ до 1 % от их массы ]. Включение 1 остатка глюкозы в молекулу гликогена сопровождается использованием 2 макроэргических эквивалентов ( 1 АТФ и 1 УТФ ), так что синтез гликогена в клетках может идти лишь при достаточной энергообеспеченности клеток. - 10 - 4.2. Мобилизация гликогена Гликоген, как резерв глюкозы, накапливается в клетках во время пищеварения и расходуется в постабсорбционном периоде.

Расщепление гликогена в печени или его мобилизация осуществляется при участии фермента гликогенфосфоррилазы часто называемой просто фосфорилазой. Этот фермент катализирует фосфоролитическое расщепление a -1,4-гликозидных связей концевых остатков глюкозы полимера: (С 6 Н 10 О 5 ) n + Н 3 РО 4 > (C 6 Н 10 О 5 ) n-1 + Гл-1-Ф Для расщепления молекулы в районе разветвлений необходимы два дополнительных фермента: так называемый дебранчинг (деветвящий ) - фермент и амило -1,6- гликозидаза , причем в результате действия последнего фермента в клетках образуется свободная глюкоза, которая может или покинуть клетку, или подвергнуться фосфорилированию. Гл-1-ф в клетках изомеризуется с участием фосфоглюкомутазы в гл-6-ф.

Дальнейшая судьба гл-6-фосфата определяется наличием или отсутствием в клетках фермента глюкозо -6- фосфатазы . Если фермент присутствует в клетке, он катализирует гидролитическое отщепление от гл-6-фосфата остатка фосфорной кислоты с образованием свободной глюкозы: Гл-6-ф + Н 2 О > Глюкоза + Н 3 РО 4 которая может проникать через наружную клеточную мембрану и поступать в кровяное русло. Если же глюкозо-6-фосфатазы в клетках нет, то дефосфорилирования глюкозы не происходит и глюкозный остаток может быть утилизирован только данной конкретной клеткой.

Заметим, что расщепление гликогена до глюкозы не нуждается в дополнительном притоке энергии. В большинстве органов и тканей человека глюкозо-6-фосфатаза отсутствует, поэтому запасенный в них гликоген используется лишь для собственных нужд.

Типичным представителем таких тканей является мышечная ткань.

Глюкозо-6-фосфатаза имеется лишь в печени, почках и кишечнике, но наиболее существенным является наличие фермента в печени ( точнее, в гепатоцитах ), т.к. этот орган выполняет роль своего рода буфера, поглощающего глюкозу при повышении ее содержания в крови и поставляющего глюкозу в кровь, когда концентрация глюкозы в крови начинает падать. - 11 - 4.3. Регуляция процессов синтеза и распада гликогена Сопоставив метаболические пути синтеза и мобилизации гликогена, мы увидим, что они различны: АТФ АДФ УТФ Ф-Ф УДФ ^ ^ ^ > Гл-6-ф > Гл-1-ф > УДФ-Гл ГЛЮКОЗА > ГЛИКОГЕН Н 3 РО 4 Гл-6-ф Гл-1-ф ^ ^ Н 2 О Н 3 РО 4 Это обстоятельство дает возможность раздельно регулировать обсуждаемые процессы.

Регуляция осуществляется на уровне двух ферментов: гликогенсинтетазы, участвующей в синтезе гликогена, и фосфорилазы, катализирующей расщепление гликогена.

Основным механизмом регуляции активности этих ферментов является их ковалентная модификация путем фосфорилирования-дефосфорилирования.

Фосорилированная фосфорилаза или фосфорилаза 'a' высокоактивна, в то же время фосфорилированная гликогенсинтетаза или синтетаза 'b' неактивна. Таким образом, если оба фермента находятся в фосфорилированной форме, в клетке идет расщепление гликогена с образованием глюкозы. В дефосфорилированном состоянии, наоборот, неактивна фосфорилаза ( в форме 'b') и активна гликогенсинтетаза ( в форме 'a' ), в этой ситуации в клетке идет синтез гликогена из глюкозы.

Поскольку гликоген печени играет роль резерва глюкозы для всего организма, его синтез или распад должен контролироваться надклеточными регуляторными механизмами, работа которых должна быть направлена на поддержание постоянной концентрации глюкозы в крови. Эти механизмы должны обеспечивать включение синтеза гликогена в гепатоцитах при повышенных концентрациях глюкозы в крови и усиливать расщепление гликогена при падении содержания глюкозы в крови. - 12 - Итак, первичным сигналом, стимулирующим мобилизацию гликогена в печени, является снижение концентрации глюкозы в крови. В ответ на него альфа-клетки поджелудочной железы выбрасывают в кровь свой гормон - глюкагон.

Глюкагон, циркулирующий в крови, взаимодействует со своим белком-рецептором, находящемся на внешней стороне наружной клеточной мембраны гепатоцита. образуя гор - мон-рецепторный комплекс.

Образование гормон-рецепторного комплекса приводит с помощью специального механизма к активации фермента аденилатциклазы , находящегося на внутренней поверхности наружной клеточной мембраны.

Фермент катализирует образование в клетке циклической 3,5-АМФ ( цАМФ ) из АТФ. В свою очередь, цАМФ активирует в клетке фермент цАМФ - за - висимую протеинкиназу . Неактивная форма протеинкиназы представляет собой олигомер, состоящий из четырех субъединиц: 2 регуляторных и двух каталитических. При повышении концентрации цАМФ в клетке к каждой из регуляторных субъединиц протеинкиназы присоединяется по 2 молекулы цАМФ, конформация регуляторных субъединиц - изменяется и олигомер распадается на регуляторные и каталитичес - кие субъединицы.

Свободные каталитические субъединицы катализирует фосфорилирование в клетке ряда ферментов, в том числе фосфорилирование гликогенсинтетазы с переводом ее в неактивное состояние, выключая таким образом синтез гликогена . Одновременно идет фос - форилирование киназы фосфорилазы , а этот фермент, активируясь при его фосфорилировании, в свою очередь катализирует фосфорилирование фосфорилазы с переводом его в активную форму, т.е. в форму 'a'. В результате активации фосфорилазы включается расщепление гликогена и гепатоциты начинают поставлять глюкозу в кровь.

Попутно отметим, что при стимуляции расщепления гликогена в печени катехоламинами в качестве главных посредников выступают b - рецепторы гепатоцитов, связывающие адреналин. При этом происходит повышение содержания ионов Са в клетках, где они стимулируют Са/кальмодулинчувствительную киназу фосфорилазы, которая в свою очередь активирует фосфорилазу путем её фосфорилирования. - 13 - _Схема активации расщепления гликогена в гепатоцитах Снижение содержания > Активация цАМФ-зависимой глюкозы в крови протеинкиназы Глюкагон Синтез Фосфорилирование Фосфорилирование цАМФ из АТФ киназы фосфорилазы гликогенсинте- ^ тазы Образование Фосфорилирование гормон-рецегликогенфосфориБлокирование пторного лазы синтеза комплекса гликогена Активация расщепАктивация ления гликогена аденилатциклазы Поступление глюкозы в кровь Повышение концентрации глюкозы в крови является внешним сигналом для гепатоцитов в отношении стимуляции синтеза гликогена и связывания таким образом излишней глюкозы из русла крови. _Схема активации синтеза гликогена в печени Повышение Повышение Активация содержания > содержания > фосфопротеинглюкозы в глюкозы в фосфатазы крови гепатоцитах Активация Инактивагликогенция фосфосинтетазы рилазы Активация синтеза гликогена Снижение содержания глюкозы в крови - 14 - Срабатывает следующий механизм: при повышении концентрации глюкозы в крови возрастает и ее содержание в гепатоцитах.

Повышение концентрации глюкозы в гепатоцитах, в свою очередь, достаточно сложным путем активирует в них фермент фосфопротеинфосфатазу , которая ка - тализирует отщепление от фосфорилированных белков остатков фосфорной кислоты.

Дефосфорилирование активной фосфорилазы переводит ее в неактивную форму, а дефосфорилирование неактивной гликогенсинтетазы активирует фермент. В результате система переходит в состояние, обеспечивающие синтез гликогена из глюкозы. В снижении фосфорилазной активности в гепатоцитах определенную роль играет гормон b -клеток поджелудочной железы инсулин. Он выделяется b -клетками в ответ на повышение содержания глюкозы в крови. Его связывание с инсулиновыми рецепторами на поверхности гепатоцитов приводит к активации в клетках печени фермента фосфодиэстеразы , катализирующего превращение цАМФ в обычную АМФ, не обладающую способность стимулировать образование активной протеинкиназы. Этим путем прекращается нарабатывание в гепатоцитах активной фосфорилазы, что также имеет значение для ингибирования расщепления гликогена.

Вполне естественно, что механизмы регуляции синтеза и распада гликогена в клетках различных органов имеют свои особенности. В качестве примера можно указать, что в миоцитах покоящихся мышц или мышц, выполняющих небольшую по интенсивности работу, практически нет фосфорилазы 'a', но расщепление гликогена все же идет. Дело в том, что мышечная фосфорилаза, находящаяся в дефосфорилированном состоянии или в форме 'b', является аллостерическим ферментом и активируется имеющимися в миоцитах АМФ и неорганическим фосфатом.

Активированная таким образом фосфорилаза 'b' обеспечивает скорость мобилизации гликогена, достаточную для выполнения умеренной физической работы.

Однако при выполнении интенсивной работы, в особенности если нагрузка резко возрастает, этого уровня мобилизации гликогена становится недостаточно. В таком случае срабатывают надклеточные механизмы регуляции. В ответ на внезапно возникшую потребность в интенсивной мышечной деятельности в кровь поступает гормон адреналин из мозгового вещества надпочечников.

Адреналин, связываясь - 15 - с рецепторами на поверхности мышечных клеток, вызывает ответную реакцию миоцитов, близкую по своему механизму к только что описанной реакции гепатоцитов на глюкагон. В мышечных клетках появляется фосфорилаза 'a' и инактивируется гликогенсинтетаза, а образовавшийся гл-6-ф используется как энергетическое 'топливо', окислительный распад которого обеспечивает энергией мышечное сокращение.

Следует заметить, что высокие концентрации адреналина, наблюдающиеся в крови людей в условиях эмоционального стресса, ускоряют расщепление гликогена в печени, повышая тем самым содержание глюкозы в крови - защитная реакция, направленная на экстренную мобилизация энергетических ресурсов. О Б М Е Н У Г Л Е В О Д О В д.м.н. Е.И.Кононов лекция 2 2.1. Окислительные пути распада углеводов в тканях Важнейшими функциями моносахаридов в организме являются энергетическая и пластическая; обе эти функции реализуются в ходе окислительного распада моносахаридов в клетках. При окислении углеводов выделяется 4,1 ккал/г ( около 17 кДж/г ) свободной энергии и за счет окисления углеводов человек покрывает 55-60% своих общих энергозатрат. В ходе окисления углеводов образуется большое количество промежуточных продуктов распада, которые используются для синтеза различных липидов, заменимых аминокислот и др. необходимых клеткам соединений. Кроме того, при окислении углеводов в клетках идет генерация восстановительных потенциалов, которые в дальнейшем используются ими в восстановительных реакциях биосинтезов, в процессах детоксикации, для контроля уровня перекисного окисления липидов и др.

Главным моносахаридом, подвергающимся окислительным превращениям в клетках, является глюкоза, поскольку именно она в наибольших количествах поступает из кишечника во внутреннюю среду организма, именно она синтезируется при глюконеогенезе или образуется в свободном виде или же в виде фосфорных эфиров при расщеплении гликогена. Роль других моносахаридов менее значительна, так как их количество, поступающее в клетки в количественном отношении сильно варьирует в зависимости от состава пищи.

Известно несколько метаболических путей окисления глюкозы, главными из которых являются: а) аэробное расщепление до углекислого газа и воды; б) анаэробное окисление до лактата; в) пентозный путь окисления; г) окисление с образованием глюкуроновой кислоты.

Глубина окислительного расщепления молекулы глюкозы может быть различной: от окисления одной из концевых группировок молекул до карбоксильной группы, что происходит при образовании глюкуроновой кислоты, до полной деградации молекулы глюкозы при ее аэробном распаде. - 2 - 2.1.1. Аэробное окисление глюкозы В клетках аэробных организмов основным, по крайней мере в отношении общего количества расщепляющейся глюкозы, является ее аэробный распад до углекислого газа и воды. При расщеплении 1 М глюкозы ( 180 г ) в аэробных условиях выделяется 686 ккал свободной энергии. Сам процесс аэробного окисления глюкозы можно разделить на 3 этапа: 1. Расщепление глюкозы до пирувата. 2. Окислительное декарбоксилирование пирувата до ацетил-КоА. 3. Окисление ацетила в цикле Кребса ( ЦТК ), сопряженное с работой цепи дыхательных ферментов. Эти этапы можно представить также в виде общей схемы: Глюкоза > 2 пируват >2 ацетил-КоА > 4СО 2 + 10 Н 2 О + 2 СО 2.1.1.1. Расщепление глюкозы до пирувата По современным представлениям первый этап окисления глюкозы протекает в цитозоле и катализируется надмолекулярным белковым комплексом - гликолитическим метаболоном , включающим в себя до десятка отдельных ферментов.

Первый этап окисления глюкозы может быть в свою очередь разделен на 2 стадии. В реакциях первой стадии происходит фосфорилирование глюкозы, изомеризация остатка глюкозы в остаток фруктозы, дополнительное фосфорилирование уже фруктозного остатка и, наконец. расщепление гексозного остатка на два остатка фосфотриоз: СН 2 ОН СН 2 ОРО 3 Н 2 1. С О С О Н /Н ОН Н /Н ОН С С + АТФ > С С + АДФ НООН Н/Н НООН Н/Н С С С С Н ОН Н ОН Глюкоза Глюкозо-6-фосфат - 3 - Эта реакция катализируется ферментом гексокиназой . В качестве фосорилирующего агента в клетке используется АТФ. Реакция сопровождается потерей свободной энергии порядка 5,0 ккал/моль и в условиях клетки является необратимой. СН 2 ОРО 3 Н 2 2. С О РО 3 Н 2 О СН 2 О Н /Н ОН / Н С С > С С НООН Н/Н НН НО/ С С С С СН 2 ОН Н ОН ОН Н Глюкозо-6-фосфат Фруктозо-6-фосфат Вторая реакция, катализируемая фосфогексоизомеразой , легко обратима. РО 3 Н 2 О СН 2 О РО 3 Н 2 О СН 2 О / Н / Н 3. С С + АТФ > С С + АДФ НН НО/ НН НО/ С С СН 2 ОН С С СН 2 О-РО 3 Н 2 ОН Н ОН Н Фруктозо-6-фосфат Фруктозо-1,6-бисфосфат Третья реакция катазируется ферментов фосфофруктокиназой . В этой реакции также теряется 3,4 ккал/моль энергии и она, как и гексокиназная реакция, в условиях клетки необратима. РО 3 Н 2 О СН 2 О СН 2 ОН НС=О / Н С С > С=О + НСОН 4 . НН НО/ С С СН 2 О-РО 3 Н 2 Н 2 СО-РО 3 Н 2 Н 2 СО-РО 3 Н 2 ОН Н Фосфодигидр- 3-ФосфоглиФруктозо-1,6-бисфосфат оксиацетон цериновый альдегид - 4 - Эта реакция катализируется ферментом альдолазой , реакция обратима. В результате реакции фруктозо-1,6-бисфосфат расщепляется на два триозофосфата . СН 2 ОН НС=О > 5 . С=О НСОН Н 2 СО-РО 3 Н 2 Н 2 СО-РО 3 Н 2 Фосфодигидр- 3-Фосфоглиоксиацетон цериновый альдегид Фосфодигидроксиацетон ( ФДА ) в условиях клетки легко изомеризуется в 3-фосфоглицериновый альдегид ( ФГА ) при участии фермента триозофосфатизомеразы в ходе пятой реакции.

Поэтому мы можем считать, что на первой стадии этого этапа затрачивается 2 АТФ, а из молекулы глюкозы образуется две молекулы 3-фосфоглицеринового альдегида. На второй стадии первого этапа окисления глюкозы ФГА превращается в пируват.

Поскольку при распаде молекулы глюкозы образуется 2 молекулы ФГА, при дальнейшем описании процесса мы дожны учесть это обстоятельство.

Следующая реакция рассматриваемого процесса является окислительной реакцией: НС=О О=С ~ О-РО 3 Н 2 6. 2 НСОН + 2НАД + + 2Н 3 РО 4 > 2 НСОН + 2НАДН+Н + Н 2 СО-РО 3 Н 2 Н 2 СО-РО 3 Н 2 ФГА 1,3-дифосфоглицериновая кислота В ходе этой реакции, катализируемой дегидрогеназой 3 - фосфоглице - ринового альдегида , происходит окисление ФГА в 1,3-дифосфоглицериновую кислоту.

Окисление идет путем дегидрирования, а отщепленные от субстрата атомы водорода переносятся на НАД + с образованием восстановленной формы кофермента.

Энергия окисления накапли- - 5 - вается в клетке , во-первых, в виде энергии восстановленного НАДН+Н + ,а, во-вторых, в виде макроэргической связи продукта окисления с участвующей в реакции фосфорной кислотой, т.е. в макроэргической связи 1,3-дифосфоглицериновой кислоты. В седьмой реакции остаток фосфорной кислоты из 1,3-дифосфоглицерата вместе с запасом энергии, накопленной в макроэргической связи, переносится на АДФ с образованием АТФ: О=С ~ О-РО 3 Н 2 СООН 7. 2 НСОН + 2 АДФ > 2 НСОН + 2 АТФ Н 2 СО-РО 3 Н 2 Н 2 СО-РО 3 Н 2 1,3-дифосфоглицериновая 3-фосфоглицериновая кислота кислота Эта обратимая реакция катализируется ферментом фосфоглицераткина - зой . Далее идет обратимая изомеризация 3-фосфоглицериновой кислоты в 2-фосфоглицериновую кислоту при участии фермента фосфоглицератмутазы : СООН СООН 8. 2 НСОН > 2 НСО-РО 3 Н 2 Н 2 СО-РО 3 Н 2 Н 2 СОН В следующей , девятой по счету , реакции идет отщепление воды от 2-фосфоглицериновой кислоты: СООН СООН 9. 2 НСО-РО 3 Н 2 > 2 С ~ О-РО 3 Н 2 + 2 Н 2 О Н 2 СОН СН 2 3-фосфоглицериновая Фосфоенолпировинокислота градная кислота ( ФЭП ) В ходе отщепления воды идет перераспределение электронной плотности в молекуле с образованием макроэргической связи между вторым атомом углерода енольной формы пировиноградной кислоты и остатком фосфорной кислоты.

Реакция обратима, она катализируется ферментом - 6 - енолазой . Накопленная в макроэргической связи ФЭП энергия вместе с остатком фосфорной кислоты в ходе следующей реакции переносится на АДФ с образованием АТФ. Реакция катализируется пируваткиназой . СООН СООН !О. 2 С ~ О-РО 3 Н 2 + 2 АДФ > 2 С=О + 2 АТФ CH 2 СН 3 Реакция сопровождается потерей 7,5 ккал/моль энергии и в условиях клетки практически необратима.

Суммарное уравнение первого этапа аэробного окисления глюкозы: Глюкоза + 2 АДФ + 2 Н 3 РО 4 + 2 НАД + ----> -----> 2 пируват + 2 АТФ + 2 НАДН+Н + + 2 Н 2 О --------------------------------------------------------------- В ходе этого этапа высвобождается 140 ккал/моль энергии, основная ее часть ( около 120 ккал/моль ) накапливается в клетке в виде энергии 2 АТФ и энергии 2 восстановленных НАД + из которого следует, что на первом этапе молекула глюкозы расщепляется до двух молекул пировиноградной кислоты, при этом клетка на каждую молекулу расщепленной глюкозы получает 2 молекулы АТФ и две молекулы восстановленного НАДH+H + . Регуляция работы первого этапа аэробного расщепления глюкозы осуществляется с помощью термодинамических механизмов и с помощью механизмов аллостерической модуляции регуляторных ферментов, принимающих участие в работе этого метаболического пути. С помощью термодинамических механизмов осуществляется контроль направления потока метаболитов по данному метаболическому пути. В описанную систему реакций включены три реакции, в ходе которых теряется большое количество энергии: гексокиназная ( G 0 = - 5,0 ккал/моль ), фосфофруктокиназная ( G 0 = -3,4 ккал/моль ) и пируваткиназная ( G 0 = - 7,5 ккал/моль ). Эти реакции в клетке практически не обратимы, в особенности пируваткиназная реакция, и за счет их необратимости процесс становится необратимым в целом. - 7 - Интенсивность потока метаболитов по рассматриваемому метаболическому пути контролируется в клетке за счет изменения активности включенных в систему аллостерических ферментов: гексокиназы, фосфофруктокиназы и пируваткиназы. Таким образом, пункты термодинамического контроля метаболического пути одновременно являются и участками, на которых осуществляется регуляция интенсивности потока метаболитов.

Главным регуляторным звеном системы является фосфофруктокиназа.

Активность этого фермента подавляется высокими концентрациями АТФ в клетке, степень аллостерического ингибирования фермента АТФ усиливается при высоких концентрациях цитрата в клетке. АМФ является аллостерическим активатором фосфофруктокиназы.

Гексокиназа ингибируется по аллостерическому механизму высокими концентрациями Гл-6-ф. В этом случае мы имеем делом с работой сопряженного регуляторного механизма. В клетке после угнетения активности фосфофруктокиназы высокими концентрациями АТФ накапливается Фр-6-ф, а значит накапливается и Гл-6-ф, поскольку реакция, катализируемая фосфогексоизомеразой, легко обратима. В таком случае повышение концентрации АТФ в клетке ингибирует активность не только фосфофруктокиназы, но и гексокиназы. Очень сложно выглядит регуляция активности третьей киназы - пируваткиназы.

Активность фермента стимулируется Гл-6-ф, Фр-1,6-бф и ФГА по аллостерическому механизму - так называя активация предшественником. В свою очередь, высокие внутриклеточные концентрации АТФ,НАДН,цитрата, сукцинил-КоА и жирных кислот угнетают активность фермента по аллостерическому механизму. В целом, расщепление глюкозы до пирувата тормозится на уровне 3 указанных киназ при высокой концентрации АТФ в клетке,т.е. в условиях хорошей обеспеченности клетки энергией. При недостатке энергии в клетке активация расщепления глюкозы достигается,во первых, за счет снятия аллостерического ингибирования киназ высокими концентрациями АТФ и аллостерической активации фосфофруктокиназы АМФ и, во-вторых, за счет аллостерической активации пируваткиназы предшественниками: Гл-6-Ф, Фр-1,6-бф и ФГА. Каков смысл ингибирования цитратом фосфофруктокиназы и цитратом и сукцинил-КоА - пируваткиназы? Дело в том, что из одной молекулы глюкозы образуется две молекулы ацетил-КоА, который за- - 8 - тем окисляется в цикле Кребса. Если в клетке накапливаются цитрат и сукцинил-КоА, значит цикл Кребса не справляется с окислением уже наработанного ацетил-КоА и есть смысл притормозить его дополнительное образование, что и достигается ингибированием фосфофруктокиназы и пируваткиназы.

Наконец, угнетение окисления глюкозы на уровне пируваткиназы при повышении концентрации жирных кислот направлено на сбережение глюкозы в клетке в условиях, когда клетка обеспечена другим, более эффективным видом энергетического топлива. 2.1.1.2. Окислительное декарбоксилирование пирувата В аэробных условиях пировиноградная кислота подвергается окислительному декарбоксилированию с образованием ацетил-КоА. Это превращение катализируется надмолекулярным пируватдегидрогеназным комплексом , локализованным в матриксе митохондрий. В состав пируватдегидрогеназного комплекса входят три различных фермента: пируватдекарбоксилаза, дигидролипоатацетилтрансфераза и дегидрогеназа дигидролипоевой кислоты, их количественные соотношения в составе комплекса зависят от источника выделения, как правило это соотношение приближается к 30:1:10. Первый фермент этого комплекса - пируватдекарбоксилаза ( Е1) катализирует реакцию: Н СН 3 -СО-СООН + ТДФ-Е1 > СО 2 + СН 3 - С-ТДФ-Е1 ОН с образованием углекислого газа и активированного ацетальдегида, связанного с тиаминдифосфатом - простетической группой фермента.

Второй фермент - дигидролипоатацетильрансфераза ( Е2 ) катализирует два последовательных превращения: а) на первом этапе идет перенос активированного остатка ацетальдегида на простетическую группу фермента - липоевую кислоту, причем этот перенос сопровождается одновременным окислением альдегидной группы до карбоксильной группы: Н S HS СН 3 -С -ТДФ-Е1 + ЛК-Е2 > ЛK-Е2 + ТДФ-Е1 ОН S/ CH 3 - CS/ O б) на втором этапе остаток ацетила переносится с липоевой - 9 - кислоты, жестко связанной с ферментом, на свободный HS-КоА: HS HS ЛК-Е2 + HS-KoA > ЛК-Е2 + СН 3 - С-S-КоА СН 3 -CS/ HS/ О О Образуются ацетил-КоА и фермент Е2 с восстановленной формой кофермента.

Третий фермент - дегидрогеназа дигидролипоевой кислоты катализирует превращение восстановленной формы липоевой кислоты предыдущего фермента в окисленную форму: HS S ЛК-Е 2 + НАД + > ЛК-Е 2 + НАДН+Н + HS/ Е 3 S/ В состав фермента входит в качестве простетической группы ФАД и фактически атомы водорода с восстановленной формы липоевой кислоты вначале переносятся на ФАД, а затем уже переносятся на НАД + с образованием его восстановленной формы.

Следует напомнить, что при окислении глюкозы образуется 2 молекулы пирувата, что следует учесть при написании суммарного уравнения окислительного декарбоксилирования пирувата: 2Пируват +2НАД + +2HS-КоА --->2Ацетил-КоА +2НАДН+Н + +2СО 2 ______________________________________________________________ В ходе окисления 2 моль пирувата высвобождается около 120 ккал энергии, из них около 100 ккал накапливается ввиде энергии восстановленного НАД. Остальная энергия рассеивается в виде теплоты.

Превращение пирувата в ацетил-КоА в ходе функционирования пируватдегидрогеназного комплекса необратимо, посколько сопровождается потерей 11,5 ккал/моль энергии в расчете на 1 моль окисленного пирувата. Таким образом, мы имеем дело еще с одним пунктом термодинамического контроля в общей метаболической системе аэробного окисления глюкозы.

Контроль интенсивности потока метаболитов по пируватдегидрогеназному комплексу осуществляется за счет работы двух механизмов: ковалентной модификации и аллостерической модуляции.

Ковале- - 10 - нтная модификация реализуется в виде фосфорилирования и дефосфорилирования комплекса: Н 3 РО Н 2 О Фосфатаза Активный Неактивный комплекс > комплекс Киназа АТФ > АДФ Фосфорилирование усиливается при высоких соотношениях АТФ/АДФ, НАДН/НАД + и ацетил-КоА/КоА. Иначе говоря, активность комплекса снижается, если клетка хорошо обеспечена энергией ( много АТФ и НАДН ) или же цикл Кребса не справляется с окислением имеющегося ацетил-КоА. А дефосфорилирование стимулируется по аллостерическому механизму пируватом, т .е. накопление пирувата в клетке ускоряет его утилизацию - уже известный нам механизм стимуляции предшественником.

Образовавшийся ацетил-КоА, как уже неоднократно упоминалось. поступает в цикл трикарбоных кислот, работа которого сопряжена с функционированием цепи дыхательных ферментов. При функционировании этих двух метаболических путей остаток ацетила окисляется до углекислого газа и воды. В качестве напоминания можно привести суммарную реакцию окисления ацетила ( из ацетил-КоА ) в цикле Кребса: Ацетил-КоА + НАД + + ФАД + ГДФ + Ф + 2Н 2 О > > 2 СО 2 + КоА + ГТФ + 3 НАДН+Н + + ФАДН 2 Далее уже можно написать суммарное уравнение для всех трех этапов окисления молекулы глюкозы: Глюкоза + 2 АДФ + 2 ГДФ + 4Ф + 10 НАД + + 2 ФАД + 2 Н 2 О > > 6 СО 2 + 2 АТФ + 2 ГТФ + 10 НАДН+Н + + 2 ФАДН 2 - 11 - Из уравнения следует, что аэробное окисление одной молекулы глюкозы сопровождается образованием 6 молекул углекислого газа, 4 макроэргов ( 2АТФ и 2 ГТФ ), а также 12 восстановленных коферментов ( 10 НАДН и 2 ФАДН 2 ) Полный расчет энергетической эффективности аэробного окисления глюкозы можно произвести, руководствуясь следующей далее схемой: 2АДФ 4 АТФ 2НАДН+Н + 2НАДН+Н + 2АТФ ^ 4 АДФ +2 Ф ^ 2НАД + ^ 2НАД + ^ Глюкоза > 2 ФГА > 2 Пируват > > 2 СО 2 2 ГТФ 6НАДН+Н + 2ФАДН 2 2 ГТФ +2 Ф ^ 6НАД + ^ 2ФАД ^ > 2 Ацетил - КоА > 4 СО 2 На схеме видно следующее: а) на первом этапе при фосфорилировании гексоз расходуется 2 АТФ ; б) за счет субстратного окислительного фосфорилирования клетка получает 6 макроэргических эквивалентов ( 4АТФ + 2ГТФ) в) за счет окислительного фосфорилирования в цепи дыхательных ферментов, куда будут поступать атомы водорода с восстановленных коферментов, клетка получит 34 молекулы АТФ ( З0 молекул АТФ за счет окисления 10 НАДН и еще 4 молекулы АТФ за счет окисления 2 молекул ФАДН 2 ). Таким образом, при окислении 1 молекулы глюкозы до углекислого газа и воды клетка получит 38 молекул АТФ ( 40 синтезируется и 2 расходуется ). - 12 - Оценка энергетической эффективности процесса в плане аккумуляции энергии окисления может быть проведена исходя из того, что свободная энергии гидролиза моля макроэргических связей АТФ в стандартных условиях составляет -7,3 ккал. В таком случае окисление 1 моля глюкозы сопровождается аккумуляцией в АТФ и ГТФ 278 ккал энергии, что составляет около 40% от общего количества энергии, высвобождающейся при окислении 1 моля глюкозы (686 ккал). Второй важной функцией аэробного окисления глюкозы является пластическая функция. Из промежуточных продуктов ее окисления синтезируется много различных соединений, необходимых клетке: а) Гл-6-ф используется в клетке для синтеза пентоз и глюкуроновой кислоты, б) Фр-6-ф - для синтеза аминосахаров, в) ФГА и ФДА - для образования 3-фосфоглицерола, необходимого для синтеза глицеролсодержащих липидов, г) 3-фосфоглицериновая кислота - для синтеза заменимых аминокислот: серина, глицина и цистеина, д) ФЭП - для синтеза сиаловых кислот, используемых при синтезе гетероолигосахаридов, е) пируват - для синтеза аланина ж) ацетил-КоА - для синтеза жирных кислот и стероидов.

Безусловно, этот перечень может быть продолжен. Важно отметить, что атомы углерода из молекулы глюкозы могут оказаться в составе соединений различных классов, что было однозначно доказано с помощью метода меченых атомов. 2.1.3. Аэробное окисление других углеводов В процессе пищеварения из кишечника в кровь в ощутимых количествах могут поступать галактоза или фруктоза. При расщеплении этих соединений в клетках уже на начальных этапах происходит образование метаболитов, общих с рассмотренным нами путем распада глюкозы. 2.1.3.1. Начальный этап метаболизма галактозы Галактоза, поступающая в клетки, подвергается фосфорилированию при участии фермента галактокиназы : - 13 - СН 2 ОН СН 2 ОН С О С О НО /Н ОН НО /Н О - РО 3 Н 2 С С + АТФ > С С НОН Н/Н НОН Н/Н + АДФ С С С С Н ОН Н ОН Галактоза Галактозо-1-фосфат В следующей реакции образовавшийся Гал-1-ф взаимодействует с УДФ-глюкозой с образованием УДФ-галактозы: СН 2 ОН СН 2 ОН С О С О НО /Н О - РО 3 Н 2 НО /Н О - УДФ С С С С НОН Н/Н + УДФ-глюкоза > НОН Н/Н + Глюкозо-1- С С С С фосфат Н ОН Н ОН Галактозо-1-фосфат УДФ-галактоза Реакция катализируется ферментом гексозо 1 фосфатуридилтрансферазой . Далее УДФ-галактоза изомеризуется в УДФ-глюкозу при участии фермента эпимеразы : УДФ-галактоза > УДФ-глюкоза Затем при взаимодействии с следующей молекулой Гал-1-ф образовавшийся в составе УДФ-глюкозы глюкозный остаток выделяется в виде глюкозо-1-фосфата. Гл-1-ф изомеризуется при участии фосфоглюкомутазы в гл-6-фосфат и включается в общий путь окисления глюкозы. 2.1.3.2. Начальный этап метаболизма фруктозы Фруктоза также после поступления в клетки подвергается фосфорилированию с использованием в качестве фосфорилирующего агента АТФ. Реакция катализируется ферментом фруктокиназай . Образовавший- - 14 - ся Фр-1-ф расщепляется на глицериновый альдегид и фосфогидроксиацетон ( ФГА ) при участии фермента фруктозо - 1 - фосфатальдо - лазы . Глицериновый альдегид при участии фермента триозокиназы превращается в 3-фосфоглицериновый альдегид, в ходе фосфорилирования используется молекула АТФ, переходящая в АДФ. Фосфогидроксиацетон при участии триозофосфатизомеразы также превращается в 3-фосфоглицериновый альдегид. Таким образом, из молекулы фруктозы получается 2 молекулы 3-фосфоглицеринового альдегида, а 3-ФГА является промежуточным метаболитом окислительного расщепления глюкозы. _Схема превращения фруктозы в 2 молекулы 3 ФГА АТФ АДФ ^ АТФ АДФ Глицериновый ^ > альдегид Фруктоза > Фр-1-ф 3-фосфо- 2 глицериновый > ФДА > альдегид Возможен другой вариант начального этапа метаболизма фруктозы. В этом случае фруктоза подвергается фосфорилированию при участии фермента гексокиназы с образованием фруктозо-6-фосфата с использованием в качестве фосфорилирующего агента АТФ. Однако способность гексокиназы фосфорилировать фруктозу сильно ингибируется в присутствии глюкозы, поэтому считается маловероятным, чтобы этот вариант использования фруктозы играл сколь-либо существенную роль в ее метаболизме. 2.1.3.3. Начальный этап метаболизма гликогена Окислительное расщепление остатков глюкозы из молекулы гликогена чаще всего начинается с его фосфоролитического расщепления: при участии фермента фосфорилазы с использованием неоргани- - 15 - ческого фосфата от молекулы гликогена последовательно отщепляются моносахаридные блоки с образованием глюкозо-1-фосфата. Гл-1-ф при участии фосфоглюкомутазы превращается в гл-6-Ф - метаболит окислительного пути расщепления глюкозы. Такой путь использования гликогена характерен для клеток мышц или печени. Для клеток мозга или кожи преобладающим является амилолитический путь расщепления гликогена: вначале под действием ферментов амилазы и мальтазы гликоген расщепляется до свободной глюкозы, а затем глюкоза фосфорилируется и подвергается дальнейшему окислению уже известным нам путем. 2.1.4. Анаэробный метаболизм углеводов Человек является аэробным организмом, так как основным конечным акцептором отщепляемых от окисляемых субстратов атомов водорода является кислород.

Парциальное давления кислорода в тканях составляет в среднем 35- 40 мм рт. ст. Но это вовсе не значит, что при определенных условиях в тканях не возникает дефицит кислорода, делающий невозможным протекание аэробных окислительных процессов.

Торможение окислительных процессов при дефиците кислорода связано с тем, что клеточный пул НАД + и других коферментов. способных акцептировать атомы водорода от окисляемых субстратов, весьма ограничен. Как только основная их масса переходит в восстановленное состояние из-за дефицита кислорода, дегидрирование субстратов прекращается.

Развивается гипоэнергетическое состояние, которое может стать причиной гибели клеток. В подобного рода условиях в клетках различных органов и тканей включаются механизмы, обеспечивающие клетки энергией, не зависящие от наличия кислорода.

Основными из них являются анаэроб - ное окисление глюкозы - анаэробный гликолиз , и анаэробное расщепление гликогена - гликогенолиз . В анаэробных условиях расщепление глюкозы и гликогена идет абсолютно идентичными по сравнению с ранее рассмотренными нами метаболическими путями вплоть до образования пирувата.

Однако далее эти пути расходятся: если в аэробных условиях пируват подвергается окислительному декарбоксилированию, то в анаэробных условиях пировиноградная кислота восстанавливается в молочную кислоту.

Реакция катализируется ферментом лактатде - гидрогеназой : - 16 - СООН СООН С=О + НАДН+Н + > НСОН + НАД + СН 3 СН 3 Поскольку в ходе лактатдегидрогеназной реакции используются молекулы НАДН+Н + , ранее образовавшиеся при окислении 3-фосфоглицериноваго альдегида в 1,3-дифосфоглицериновую кислоту: Глюкоза(гликоген) > Гл-6-ф > Фр-6-ф > Фр-1,6-бисфосфат > 3-фосфогли- 1,3-дифосфо- > 2 цериновый > 2 глицериновая альдегид > кислота 2 НАД + 2 НАДН+Н + ^ 2 Молочная кислота радная кислота система становится независимой от кислорода, т.е. может работать в анаэробных условиях.

Комбинация реакций, в ходе которых окисление 3-ФГА в 1,3-ДФГК генерирует НАДН+Н + , используемый в дальнейшем для восстановления пирувата в лактат, получила название гликоли - тической оксидоредукции . Разумеется, расщепление глюкозы до лактата сопровождается высвобождением лишь 1/12 - 1/13 всей заключенной в химических связях глюкозы энергии ( ~ 50 ккал/моль ), тем не менее на каждую распавшуюся в ходе анаэробного гликолиза молекулу глюкозы клетка получает 2 молекулы АТФ (2 АТФ расходуется и 4 АТФ синтезируется). При гликогенолизе клетка получит 3 молекулы АТФ на каждый остаток глюкозы из молекулы гликогена ( 1 АТФ расходуется и 4 АТФ синтезируется ). Несмотря на очевидную невыгодность в отношении количества высвобождаемой энергии анаэробные гликолиз и гликогенолиз позволяют клеткам существовать в условиях отсутствия кислорода. - 17 - Суммарное уравнение гликолиза: Глюкоза + 2 АДФ + 2 Н 3 РО 4 > 2 Лактат + 2 АТФ + 2 Н 2 О Анаэробный путь окисления глюкозы и анаэробное расщепление гликогена играют важную роль в обеспечении клеток энергией, вопервых, в условиях высокой экстренно возникающей функциональной нагрузки на тот или иной орган или организм в целом, примером чего может служить бег спортсмена на короткую дистанцию. Во-вторых, эти процессы играют большую роль в обеспечении клеток энергией при гипоксичеких состояниях, например, при тромбозах артерий в период до развития коллатерального кровообращения или при тяжелых шоковых состояниях с выраженными расстройствами гемодинамики.

Активация анаэробного окисления углеводов приводит к увеличению продукции лактата в клетках и тканях. При сохранении кровообращения этот наработанный в клетках лактат выносится кровью и основная его часть метаболизируется в печени или в сердечной мышце. В миокарде лактат окисляется до углекислого газа и воды; в печени же лишь примерно 1/5 поступающего лактата подвергается окислению до конечных продуктов, а 4/5 - ресинтезируются в глюкозу в ходе интенсивно идущего в печени процесса глюконеогенеза. Если же вынос лактата из гипоксической ткани невозможен, то при его накоплении в клетках за счет повышения концентрации протонов ингибируется фосфофруктокиназа, в результате чего ингибируются и гликолиз, и гликогенолиз.

Клетки, лишенные последних источников энергии, обычно погибают, что наблюдается при инфарктах различных органов, в особенности при инфаркте миокарда.

Следует заметить, что в клетках некоторых органов и тканей человека образование молочной кислоты происходит и в обычных, т.е. в аэробных условиях. Так. в эритроцитах, не имеющих митохондрий. все необходимое для них количество энергии вырабатывается в ходе гликолиза. К тканям с относительно высоким уровнем аэробного гликолиза относятся также сетчатка глаза и кожа.

Высокий уровень аэробного гликолиза присущ также многим опухолям. . О Б М Е Н У Г Л Е В О Д О В д.м.н. Е.И.Кононов Лекция 3 Биосинтетические процессы, протекающие в клетках, нуждаются не только в энергии, им необходимы также восстановительные эквиваленты в виде НАДФН+Н + и целый ряд моносахаридов, имеющих в своем составе пять атомов углерода,такие как рибоза,ксилоза и др.Образование восстановленного НАДФ идет в пентозном цикле окисления углеводов, а образование пентоз может происходить как в пентозном цикле окисления, так и в других метаболических путях. 3.1. Пентозный путь окисления углеводов Этот метаболический путь известен также как пентозофосфатный цикл окисления глюкозы или апотомический путь окисления.

Пентозный путь окисления углеводов включает в себя достаточно много отдельных парциальных реакций. Он может быть разделен на две части: окислительный его этап и неокислительный этап. Мы с вами остановимся преимущественно на его окислительном этапе, поскольку этого вполне достаточно, чтобы понять биологическую роль рассматриваемого метаболического процесса. Итак, как обычно, первой реакцией является реакция фосфорилирования глюкозы: Глюкоза + АТФ > Гл-6-ф + АДФ катализируемая гексокиназной. На следующей стадии происходит окисление Гл-6-ф путем его дегидрирования: СН 2 ОРО 3 Н 2 СН 2 ОРО 3 Н 2 НАДФН+Н + С О НАДФ + ^ С О Н/Н ОН Н/Н С С > С С=О НООН Н/Н НООН Н/ С С С С Н ОН Н ОН Гл-6-ф 6-фосфоглюконолактон - 2 - Реакция катализируется глюкозо-6-фосфатдегидрогеназай. Далее идет взаимодействие 6-фосфоглюконолактона с молекулой воды, что сопровождается разрывом цикла с образование 6-фосфоглюконовой кислоты.

Реакция катализируется ферментом лактоназой . А затем 6-фосфоглюконат подвергается окислительному декарбоксилированию с образованием рибулозо-5-фосфата, углекислого газа и восстановленного НАДФ; эта реакция катализируется 6- фосфоглюконатде - гидрогеназой . Последовательность из двух описанных реакций представлена на приведенной ниже схеме: СН 2 ОРО 3 Н 2 СООН СН 2 ОН НАДФН+Н + С О НСОН НАДФ + ^ С=О Н/Н С С=О + Н 2 О > НОСН > НСОН НООН Н/ - СО 2 С С НСОН НСОН Н ОН НСОН Н 2 СО-РО 3 Н 2 6-фосфоглюконо - Рибулозо-5- лактон Н 2 СО - РО 3 Н 2 фосфат 6-фосфоглюконат Суммарное уравнение окислительного этапа пентозного цикла окисления : Глюкоза + АТФ + 2 НАДФ + + Н 2 О > > Рибулозо-5-ф + СО 2 + 2НАДФН+Н + + АДФ Часто началом пентозного цикла окисления углеводов считают реакцию окисления Гл-6-ф, в последнем случае суммарное уравнение окислительного этапа цикла приобретает вид: Гл-6-ф + 2НАДФ + + Н 2 О > Рибулозо-5-ф + СО 2 + 2НАДФН+Н + В ходе неокислительного этапа цикла в результате изомеризации образуются необходимые для клетки фосфорилированные пентозы : рибо- - 3 - зо-5-фосфат и ксилулозо-5-фосфат. Кроме того, важно отметить ,что на этом этапе образуются промежуточные продукты, идентичные с промежуточными продуктами первого этапа аэробного окисления глюкозы: 3-фосфоглицериновый альдедид и Фр-6-ф. За счет этих общих промежуточных соединений создается возможность переключения потока метаболитов с пентозного цикла окисления на путь аэробного (или анаэробного) окисления глюкозы и наоборот. За шесть оборотов пентозного цикла окисления полностью сгорает один остаток глюкозы, так что суммарное уравнение окисления глюкозы в цикле, начиная с Гл-6-ф, можно представить в следующем виде: Гл-6-ф + 7 Н 2 О + 12 НАДФ + > 6 СО 2 + Ф + 12 НАДФН+Н + Пентозофосфатный цикл активно функционирует в печени, жировой ткани, коре надпочечников, семенниках и в молочной железе в период лактации. В этих тканях активно идут процессы синтеза высших жирных кислот, аминокислот или стероидов, нуждающиеся в восстановительных эквивалентах в виде НАДФН+Н + .Цикл интенсивно работает также в эритроцитах, в которых НАДФН+Н + используется для подавления перекисного окисления мембранных липидов.

Мышечная ткань содержит очень малые количества глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и 6-фосфоглюконатдегидрогеназы, тем не менее, она также способна синтезировать необходимую клеткам рибозу. 3.2. Путь образования глюкуроновой кислоты Глюкуроновая кислота является соединением, выполняющим в организме несколько функций: а) она входит в состав гетероолигои гетерополисахаридов, выполняя таким образом структурную функцию, б) она принимает участие в процессах детоксикации, в) она может быть преобразована в клетках в пентозу - ксилулозу ( которая , кстати, является общим промежуточным метаболитом с пентозным циклом окисления глюкозы ). В организме большинства млекопитающих по этому метаболическому пути идет синтез аскорбиновой кислоты; к сожалению, у приматов и морских свинок не синтезируется один из ферментов, необходимых - 4 - для превращения глюкуроновой кислоты в аскорбиновую и человек нуждается в поступлении аскорбиновой кислоты с пищей. Схема метаболического пути синтеза глюкуроновой кислоты: СН 2 ОН СН 2 ОРО 3 Н 2 СН 2 ОН АТФ АДФ С О ^ С О С О Н /Н Н Н /Н Н Н /Н ОН С С > С С > С С > НООН Н/ОН ГексокиНООН Н/ОН ФГМ НООН Н/О-РО 3 Н 2 С С наза С С С С Н ОН Н ОН Н ОН СН 2 ОН СООН УТФ Ф-Ф 2НАД + 2НАДН+Н + ^ С О ^ С О Н /Н Н Н /Н Н > С С > С С УДФ-глюкозоНООН Н/О - УДФ Дегидрогеназа НООН Н/О - УДФ пирофосфориС С УДФ-глюкозы С С лаза Н ОН Н ОН 3.3. Г л ю к о н е о г е н е з В условиях недостаточного поступления углеводов в пище или даже их полного отсутствия все необходимые для организма человека углеводы могут синтезироваться в клетках. В качестве соединений, углеродные атомы которых используются при биосинтезе глюкозы,могут выступать лактат, глицерол, аминокислоты и др. Сам процесс синтеза глюкозы из соединений неуглеводной природы носит название глюконеогенез . В дальнейшем из глюкозы или из промежуточных продуктов ее метаболизма могут быть синтезированы все другие соединения, относящиеся к углеводам.

Рассмотрим процесс синтеза глюкозы из лактата. Как мы уже упоминали, в гепатоцитах примерно 4/5 поступающего из крови лактата преобразуется в глюкозу.

Синтез глюкозы из лактата не может быть простым обращением процесса гликолиза, так как в гликолиз включены три киназные реакции: гексокиназная,фосфофруктокиназная и пируваткиназная - необратимые по термодинамическим причинам. - 5 - Вместе с тем, в ходе глюконеогенеза используются ферменты гликолиза, катализирующие соответствующие обратимые равновесные реакции, типа альдолазы или енолазы.

Глюконеогенез из лактата начинается с превращения последнего в пируват с участием фермента лактатдегидрогеназы: СООН СООН 2 НСОН + 2 НАД + > 2 С=О + 2 НАДН+Н + СН 3 СН 3 Лактат Пируват Наличие индекса '2' перед каждым членом уравнения реакции обусловлено тем, что для синтеза одной молекулы глюкозы требуется две молекулы лактата.

Пируваткиназная реакция гликолиза необратима, поэтому невозможно получить фосфоенолпируват (ФЭП) непосредственно из пирувата. В клетке эта трудность преодолевается с помощью обходного пути, в котором участвуют два дополнительных фермента, не работающие при гликолизе.

Вначале пируват подвергается энергозависимому карбоксилированию с участием биотинзависимого фермента пируват - карбоксилазы : СООН СООН 2 С=О + 2 СО 2 + 2 АТФ > 2 С=О + 2 АДФ + 2 Ф СН 3 СН 2 Пируват СООН Щавелевоуксусная к-та А затем в результате энергозависимого декарбоксилирования щавелевоуксуная кислота превращается в ФЭП. Эту реакцию катализирует фермент фосфоенолпируваткарбоксикиназа ( ФЭП-карбоксикиназа ) , а источником энергии является ГТФ: СООН Щавелево - 2 уксусная + 2 ГТФ > 2 С ~ О-РО 3 Н 2 +2 ГДФ +2 Ф кислота СН 2 Фосфоенолпируват - 6 - Далее все реакции гликолиза вплоть до реакции, катализируемой фосфофруктокиназой обратимы.

Необходимо лишь наличие 2 молекул восстановленного НАД, но он получен в ходе лактатдегидрогеназной реакции. Кроме того, необходимы 2 молекулы АТФ для обращения фосфоглицераткиназной киназной реакции: 2 ФЭП + 2 НАДН+Н + + 2 АТФ > Фр-1,6-бисФ + 2НАД + + 2АДФ + 2Ф Необратимость фосфофруктокиназной реакции преодолевается путем гидролитеческого отщепления от Фр-1,6-бисФ остатка фосфорной кислоты, но для этого требуется дополнительный фермент фруктозо - 1,6- бисфосфатаза : Фр-1,6-бисФ + Н 2 О > Фр-6-ф + Ф Фруктозо-6-фосфат изомеризуется в глюкозо-6-фосфат, а от последнего гидролитеческим путем при участии фермента глюко - зо-6-фосфатазы отщепляется остаток фосфорной кислоты, чем преодолевается необратимость гексокиназной реакции: Гл-6-Ф + Н 2 О > Глюкоза + Ф Суммарное уравнение глюконеогенеза из лактата: 2 лактат + 4 АТФ + 2 ГТФ + 6 Н 2 О > > Глюкоза + 4 АДФ + 2 ГДФ + 6 Ф Из уравнения следует, что на синтез 1 молекулы глюкозы из 2 молекул лактата клетка затрачивает 6 макроэргических эквивалентов. Это означает, что синтез глюкозы будет идти лишь в том случае, когда клетка хорошо обеспечена энергией.

Промежуточным метаболитом глюконеогенеза являются ЩУК, которая одновременно является и промежуточным метаболитом цикла трикарбонывых кислот.

Отсюда следует: любое соединение , углеродный скелет которого может быть превращен в ходе обменных процессов в один из промежуточных продукта цикла Кребса или в пируват , может через преобразование его в ЩУК быть использовано для синтеза глюкозы . Этим путем для синтеза глюкозы используются углеродные ске- - 7 - леты ряда аминокислот.

Некоторые аминокислоты, например, аланин или серин, в ходе своего расщепления в клетках преобразуются в пируват, также, как мы уже выяснили, являющийся промежуточным продуктом глюконеогенеза.

Следовательно, и их углеродные скелеты могут быть использованы для синтеза глюкозы.

Наконец, при расщеплении глицерола в клетках в качестве промежуточного продукта образуется 3-фосфоглицериновый альдегид, который тоже может включаться в глюконеогенез. Мы выяснили, что для протекания глюконеогенеза требуется 4 фермента, не принимающих участия в окислительном расщеплении глюкозы - это пируваткарбоксилаза, фосфоенолпируваткарбоксикиназа, фруктозо-1,6-бисфосфатаза и глюкозо-6-фосфатаза.

Естественно ожидать, что регуляторными ферментами глюконеогенеза будут ферменты, не принимающие участие в расщеплении глюкозы.

Такими регуляторными ферментами являются пируваткарбоксилаза и фруктозо-1,6-бисфосфатаза.

Активность пируваткарбоксилазы ингибируется по аллостерическому механизму высокими концентрациями АДФ,а активность Фр-1,6- бисфосфатазы также по аллостерическому механизму угнетается высокими концентрациями АМФ. Таким образом, в условиях дефицита энергии в клетках глюконеогенез будет заторможен, во-первых, из-за недостатка АТФ, а, во-вторых, из-за аллостерического ингибирования двух ферментов глюконеогенеза продуктами расщепления АТФ -- АДФ и АМФ. Нетрудно заметить, что скорость гликолиза и интенсивность глюконеогенеза регулируются реципрокно. При недостатке энергии в клетке работает гликолиз и ингибирован глюконеогенез, в то время как при хорошем энергетическом обеспечении клеток в них работает глюконеогенез и ингибировано расщепление глюкозы.

Важным звеном в регуляции глюконеогенеза являются регуляторные эффекты ацетил-КоА, который выступает в клетке как аллостерический ингибитор пируватдегидрогеназного комплекса и одновременно служит аллостерическим активатором пируваткарбоксилазы.

Накопление ацетил-КоА в клетке, образующегося в больших количествах при окислении высших жирных кислот, ингибирует аэробное окисление глюкозы и стимулирует её синтез.

Биологическая роль глюконеогенеза чрезвычайно велика, так как глюконеогенез не только обеспечивает органы и ткани глюкозой, но еще и перерабатывает образующийся в тканях лактат, препятствуя - 8 - тем самым развитию лактат-ацидоза. За сутки в организме человека за счет глюконеогенеогенеза может быть синтезировано до 100- 120 г глюкозы, которая в условиях дефицита углеводов в пище в первую очередь идет на обеспечение энергетики клеток головного мозга. Кроме того , глюкоза необходима клеткам жировой ткани как источник глицерола для синтеза резервных триглицеридов, глюкоза необходима клеткам различных тканей для поддержания нужной им концентрации промежуточных метаболитов цикла Кребса, глюкоза служит единственным видом энергетического топлива в мышцах в условиях гипоксии , её окисление является также единственным источником энергии для эритроцитов. 3.4. Общие представления об обмене гетероолигои гетерополисахаридов Соединения смешанной природы, одним из компонентов которых является углевод, получили собирательное название - гликоконьюгаты . Все гликоконьюгаты принято делить на три класса: 1.Гликолипиды. 2.Гликопротеиды ( на углеводный компонент приходится не более 20% общей массы молекулы ). 3.Гликозаминопротеогликаны ( на белковую часть молекулы обычно приходится 2-3% общей массы молекулы ). Биологическая роль этих соединений была рассматрена ранее.

Следует лишь еще раз упомянуть о большом разнообразии мономерных единиц, образующих углеводные компоненты гликоконьюгатов: моносахариды с различным числом атомов углерода, уроновые кислоты, аминосахара, сульфатированные формы различных гексоз и их производных, ацетилированные формы аминосахаров и др. Эти мономеры могут быть соединены между собой различными типами гликозидных связей с образованием линейных или разветвленных структур, и если из 3 различных аминокислот можно построить лишь 6 различных пептидов, то из 3 мономеров углеводной природы можно построить до 1056 разных олигосахаридов. Такое разнообразие структуры гетерополимеров углеводной природы говорит о колоссальном объёме содержащейся в них информации, вполне сопоставимом с объемом информации, имеющимся в белковых молекулах. - 9 - 3.4.1. Представление о синтезе углеводных компонентов гликозаминопротеогликанов Углеводными компонентами гликозаминопротеогликанов являются гетерополисахариды: гиалуроновая кислота, хондроитинсульфаты, кератансульфат или дерматансульфат, присоединенные к полипептидной части молекулы с помощью О-гликозидной связи через остаток серина.

Молекулы этих полимеров имеют неразветвленную структуру. В качестве примера можно привести схему строения гиалуроновой кислоты: Сер-О-Ксил-О-Галакт-О-Галакт-О-ГлюкурО - Ацетил- -ОГлюкурк-та глюкозк-та n амин Из приведенной схемы следует,что молекула гиалуроновой кислоты присоединена к полипептидной цепи белка с помощью О-гликозидной связи. Сама же молекула состоит из связующего блока, состоящего из 4 мономерных единиц ( Кси, Гал, Гал и Гл.К ), соединенных между собой опять-таки гликозидными связями и основной части, построенной из 'n'-ного числа биозных фрагментов, в состав каждого из которых входит остаток ацетилглюкозамина ( АцГлАм ) и остаток глюкуроновой кислоты ( Гл.К), причем связи внутри блока и между блоками -- О-гликозидные. Число 'n' составляет несколько тысяч.

Синтез полипептидной цепи идет на рибосомах с помощью обычного матричного механизма. Далее полипептидная цепь поступает в аппарат Гольджи и уже непосредственно на ней происходит сборка гетерополисахаридной цепи.

Синтез носит нематричный характер, поэтому последовательность присоединения мономерных единиц определяется специфичностью участвующих в синтезе ферментов. Эти ферменты носят общее название гликозилтрансферазы.

Каждая отдельная гликозилтрансфераза обладает субстратной специфичностью как к присоединяемому ею моносахаридному остатку, так и к структуре надстраиваемого ею полимера.

Пластическим материалом для синтеза служат активированные формы моносахаридов. В частности, при синтезе гиалуроновой кисло- - 10 - ты используются УДФ-производные ксилозы, галактозы, глюкуроновой кислоты и ацетилглюкозамина.

Вначале под действием первой гликозилтрансферазы ( Е 1 ) происходит присоединение остатка ксилозы к радикалу серина полипептидной цепи, затем при участии двух различных гликозилтрансфераз ( Е 2 и Е 3 ) к строящейся цепи присоединяется 2 остатка галактозы и при действии четвертой галактозилтрансферазы ( Е 4 ) завершается формирование связующего олигомерного блока присоединением остатка глюкуроновой кислоты.

Дальнейшее наращивание полисахаридной цепи идет путем повторного чередующегося действия двух ферментов, один из которых катализирует присоединение остатка ацетилглюкозамина ( Е 5 ) , а другой - остатка глюкуроновой кислоты ( Е 6 ). _Схема биосинтеза УДФ УДФ УДФ УДФ ^ ^ ^ ^ УДФ-Кси УДФ-Гал УДФ-Гал УДФ-Гл.К. Сер --- О --- Кси --- О --- Гал --- О --- Гал --- О --- Г л.К.-- Е 1 Е 2 Е 3 Е 4 УДФ УДФ ^ ^ УДФАцГлАм УДФ-Гл.К. -- ------- О ---- АцГлАм ---- О ---- Гл.К. --- - Е 5 Е 6 'n' Синтезированная таким образом молекула поступает из аппарата Гольджи в область наружной клеточной мембраны и секретируется в межклеточное пространство. В состав хондроитинсульфатов, кератансульфатов и др. гликозаминогликанов встречаются сульфатированные остатки мономерных единиц. Это сульфатирование происходит после включения соответс- - 11 - твующего мономера в полимер и катализируется специальными ферментами.

Источником остатков серной кислоты является фосфоаденозинфосфосульфат ( ФАФС ) - активированная форма серной кислоты. 3.4.2. Представление о синтезе гетероолигосахаридных компонентов гликопротеидов Углеводные компоненты гликопротеидов могут быть присоединены к белковой части молекулы с помощью О-гликозидной связи через ОНрадикала серина или с помощью N-гликозидной связи через амидный азот радикала аспарагина.

Механизмы синтеза этих гетеоролигосахаридных компонентов гликопротеидов имеют существенные различия. Если гетероолигосахаридный блок присоединен к белковой части гликопротеида О-гликозидной связью, то его сборка идет непосредственно на полипептидной цепи, синтезированной на рибосомах. В качестве пластического материала для синтеза используются активированные остатки моносахаридов или их производных, причем используются не только УДФ-производные мономеров, но также и другие варианты, например ГДФ-манноза или ЦДФ-сиаловая кислота.

Последовательность присоединения мономеров определяется специфичностью работающих ферментов - гликозилтрансфераз. Могут синтезироваться как линейные цепи, так и разветвленные структуры: ОМанноза - О - Сиаловая / кислота Сер - О - Ксилоза - О - Манноза О - Галактоза Если же углеводный компонент гликопротеина присоединен к белковой части молекулы N-гликозидной связью, то предварительная сборка гетероолигосахаридного блока происходит на специальном переносчике долихолфосфате, который встроен в мембрану эндоплазматической сети.

Структура долихолфосфата: СН 3 СН 3 ОН ОН Н (-СН=С-СН=СН-) n -СН 2 -СН 2 -CН-СН 2 - О - Р - О - Р - ОН О О Значение 'n' обычно около 20 (чаще всего- 22) - 12 - Синтезируемый гетероолигосахарид постепенно наращивается на пирофосфатном конце молекулы опять же с участием гликозилтрансфераз,а затем с помощью специальной гликозилтрансферазы гетероолигосахаридный блок целиком переносится на амидную группу полипептидной цепи гликопротеида. Этот гетероолигосахаридный блок может быть полностью сформированным или же он нуждается еще в дополнительной достройке, которая обычно завершается в аппарате Гольджи. Далее готовый гликопротеид транспортируется или в нужную часть клетки, или же секретируется в межклеточную среду - туда, где данный белок выполняет свои функции. 3.4.3. Расщепление углеводных компонентов гликозаминопротеогликанов и гликопротеидов Расщепление углеводных компонентов гликоконьюгатов происходит в лизосомах клеток при участии ферментов гликозидаз и сульфатаз. Эти ферменты отличаются по своей субстратной специфичности как в отношении моносахаридных звеньев, между которыми они расщепляют гликозидные связи, так и по типу связей, гидролитический разрыв которых они катализируют.

Известно около 40 различных гликозидаз, присутствующих в лизосомах. Их разделяют на эндогликозидазы и экзогликозидазы в зависимости от расположения гликозидных связей, гидролиз которых они катализируют.

Эндогликозидазы катализируют разрыв связей внутри молекулы и обычно они специфичны к типу разрываемой связи.

Экзогликозидазы катализируют отщепление концевых моносахаридных единиц, эти ферменты обычно специфичны по отношению к типу мономерных единиц.

Высвобожденные мономерные единицы покидают лизосомы и могут или повторно использоваться для синтеза углеводных компонентов гликоконьюгатов, или же расщепляться до конечных продуктов.

Гликоконьюгаты с той или иной скоростью постоянно обновляются в организме.

Период полуобновления отдельных гликопротеинов может составлять несколько суток, период полуобновления гиалуроновой кислоты по литературным данным оценивается в 2 - 4 дня, а период полуобновления хондроитинсульфатов - в 7 - 16 дней, хотя по-видимому, его продолжительность зависит от ткани, в которой происходит метаболизм того или иного гликоконьюгата. . О Б М Е Н У Г Л Е В О Д О В д.м.н. Е.И.Кононов Лекция 4 4.1. Общая схема обмена углеводов в организме Мы рассмотрели в предыдущих лекциях отдельные метаболические процессы углеводного обмена.

Сегодня мы сделаем попытку увязать эти процессы в единое целое, указав также в пределах имеющихся знаний взаимосвязи обмена углеводов с метаболизмом соединений других классов: Углеводы пищи Структурные гетерои Гексозы олигосахариды Гликоген Гексозофосфата Производные моносахаридов Триозофосфаты > ФЭП Аминокислоты П и р у в а т --- Лактат >Липиды ^ ^ Ацетил-КоА > ВЖК > Оксалоацетат > Цитрат ^ Цепь ды- > Цикл Кребса > хательных ферментов Углеводы пищи поступают во внутреннюю среду организма в виде гексоз, которые в клетках подвергаются фосфорилированию Гексозофосфаты используются для синтеза резервного гликогена или через через свои производные идут на синтез структурных полисахаридов. С другой стороны гексозофосфаты подвергаются в клетках расщеплению до конечных продуктов через триозофосфаты, пируват и ацетил-КоА. Промежуточные продукты распада гексозофосфатов, такие как триозофосфаты и ацети-КоА, используются для синтеза липидов; триозофосфаты, пируват и промежуточные продукты цикла Кребса исполь- - 2 - зуются для синтеза аминокислот.

Наконец, путем превращения пирувата в оксалоацетат углеродный скелет углеводов может использоваться для пополнения пула оксалоацетата в клетках. В свою очередь триозофосфаты из липидов и углеродные скелеты многих аминокислот используются в клетках для глюконеогенеза. 4.2. Регуляция содержания глюкозы в крови и метаболизма углеводов в организме Контроль метаболизма углеводов в организме осуществляется единой нейро-гуморальной системой, однако в её работе можно выделить три группы механизмов: а) Контроль с помощью нервных механизмов: возбуждение того или иного отдела ЦНС > передача импульсов по нервным стволам > выделение медиаторов > воздействие на обмен углеводов в клетках. б) Контроль с помощью нейро-гормональных механизмов: возбуждение подкорковых метаболических центров > выделение гормонов гипотпламуса > выделение гормонов гипофиза > выделение гормонов переферических желез внутренней секреции > воздействие гормонов на метаболизм углеводов в клетках. г) Контроль с помощью метаболитно-гуморальных механизмов типа: повышение концентрации глюкозы в крови > повышение продукции инсулина островковым аппаратом поджелудочной железы > активация процессов усвоения глюкозы клетками. Одной из важнейших задач системы регуляции обмена углеводов является поддержание концентрации глюкозы на определенном уровнев пределах 3,3 - 5,5 мМ/л - обеспечивающей нормальное снабжение клеток различных органов и тканей этим моносахаридом, служащим для них и энергетическим топливом и источником пластического материала для различных биосинтезов.

Постоянная концентрация глюкозы в крови есть результат достаточно сложного баланса процессов поступления глюкозы в кровь и процессов её утилизации в органах и тканях.

Важную роль в поддержании постоянной концентрации глюкозы в крови играет эндокринная система организма. Целый ряд гормонов повышает содержание глюкозы в крови: глюкагон, адреналин, глюкокортикоиды / для человека это в основном кортизол /, соматотропный гормон, тироксин. - 3 - Глюкагон повышает содержание глюкозы в крови за счет главным образом стимуляции процесса 'мобилизации' гликогена в печени, механизм стимуляции мы уже обсуждали. Кроме того, глюкагон стимулирует до некоторой степени процесс глюконеогенеза, причем стимуляция идет за счет повышения активности одного из ферментов глюконеогенеза фруктозо-1,6-бисфосфатазы.

Глюкагон выделяется альфа-клетками островков Лангерганса поджелудочной железы при снижении содержания глюкозы в крови.

Поскольку ответная реакция на повышение содержания глюкагона в крови базируется на изменении активности уже имеющихся в клетках ферментов, наблюдается быстрое повышение концентрации глюкозы в крови.

Следует отметить, что глюкагон не влияет на скорость расщепления гликогена в мышцах.

Адреналин секретируется в кровь мозговым веществом надпочечников в экстремальных ситуациях. В первую очередь адреналин стимулирует расщепление гликогена в мышцах, обеспечивая таким образом миоциты энергетическим топливом, однако, как мы уже знаем, в мышцах нет глюкозо-6-фосфатазы, поэтому свободная глюкоза в миоцитах не образуется и в кровь не поступает. В то же время адреналин способен ускорять расщепление гликогена в печени за счет активации фосфорилазы; образующаяся глюкоза поступает из гепатоцитов в кровь, где её концентрация повышается.

Повышение содержания глюкозы в крови в ответ на выброс в кровь из надпочечников адреналина также развивается быстро, так как обусловлено повышением активности имеющихся в гепатоцитах ферментов.

Кортизол, как и другие глюкокортикоиды, вызывают повышение содержания глюкозы в крови за счет двух эффектов: во-первых, он тормозит поступление глюкозы из крови в клетки ряда периферических тканей, таких как мышечная или соединительная ткани; во-вторых, кортизол является основным стимулятором глюконеогенеза, причем стимуляция глюконеогенеза является главным механизмом, ответственным за увеличение концентрации глюкозы крови.

Стимуляция глюконеогенеза идет за счет увеличения скорости расщепления белков в периферических тканях, увеличения потребления аминокислот печенью и увеличения в гепатоцитах количества ферментов, принимающих участие в глюконеогенезе.

Эффект кортизола развивается медленно: содержание глюкозы в крови начинает повышаться через 4 - 6 часов после введения кортизола и достигает максимума где то через сутки.

Интересно, что повышение содержания глюкозы в крови при - - 4 - ведении кортизола сопровождается и нарастанием содержания гликогена в печени, тогда как при введении глюкагона содержание гликогена в печени снижается.

Соматотропный гормон гипофиза также в целом вызывает повышение содержания глюкозы в крови, но следует помнить что его введение вызывает двухфазный ответ: в течение первой четверти часа содержание глюкозы в крови снижается, а затем развивается продолжительное повышение её уровня в крови.

Механизм этой ответной реакции окончательно не выяснен.

Предполагают, что на первом этапе происходит небольшое нарастание содержание инсулина в сыворотке крови, за счет чего и происходит снижение содержания в ней глюкозы. В более отдаленном периоде, повышение содержания глюкозы в крови является следствием нескольких эффектов: уменьшения поступления глюкозы в некоторые ткани, например, в мышцы; повышения поступления в кровь глюкагона из поджелудочной железы; уменьшения скорости окисления глюкозы в клетках в результате повышенного поступления в клетки более эффективного энергетического топлива - жирных кислот, последние , как мы говорили ранее, ингибируют пируваткиназу.

Длительное введение соматотропного гормона приводит к развитию сахарного диабета.

Тироксин также вызывает повышение содержания глюкозы в крови, однако механизм этого эффекта до настоящего времени не ясен.

Известно, что при гипертиреозе окисление глюкозы идет с нормальной или повышенной скоростью, содержание глюкозы натощак повышено, одновременно у больных с гипертиреозом снижено содержание гликогена в печени.

Гормоном, снижающим содержание глюкозы в крови, является инсулин, он выделяется в кровь бета-клетками островков Лангерганса в ответ на повышение содержания глюкозы в крови.

Снижение содержания глюкозы в крови обусловлено тремя группами эффектов: во-первых, инсулин повышает проницаемость клеточных мембран для глюкозы, способствуя переходу глюкозы из крови и межклеточной жидкости в клетки; во-вторых, инсулин улучшает усвоение глюкозы клетками, стимулируя фосфорилирование глюкозы, её окислительный распад, а также ускоряя процессы перевода глюкозы в гликоген и превращения её в триглицериды; в третьих, инсулин тормозит процессы глюконеогенеза и расщепления гликогена в гепатоцитах до глюкозы.

Ответнаяреакция на введение инсулина развивается быстро. - 5 - Следует заметить, что в физиологическом плане гормоны глюкагон и инсулин не являются антагонистами: глюкагон обеспечивает перевод резервного гликогена печени в глюкозу, а инсулин обеспечивает поступление этой глюкозы из крови в клетки периферических тканей и её последующую утилизацию в клетках.

Синтез гликозаминогликанов стимулируется тестостероном и соматотропным гормоном, причем под действием соматотропина в печени синтезируется пептид из группы соматомединов, так называемый сульфатирующий фактор, именно последний и является истинным стимулятором синтеза гетерополисахаридов межклеточного вещества соединительной ткани.

Синтез гликозаминогликанов тормозят глюкокортикоиды.

Отмечено, что в местах иньекций кортизола количество межклеточного вещества в соединительной ткани уменьшается. 4.3. Патология углеводного обмена Нарушения углеводного обмена достаточно многочисленны и разнообразны. Эти нарушения могут быть первичными - в таком случае они обусловлены генетическим дефектом, выражающемся в нарушении выработки того или фермента: фермент может не синтезироваться вообще, он может синтезироваться в недостаточном количестве или же он синтезируется с измененными каталитическими или регуляторными свойствами. В любом из этих случаев нарушаются процессы углеводного обмена, что проявляется или в виде заболеваний, или в виде наследственной предрасположенности к развитию того или иного заболевания.

Вторую группу нарушении составляют вторичные нарушения обмена углеводов, развивающиеся на фоне того или иного заболевания. Так, многие эндокринные заболевания:сахарный диабет,бронзовая болезнь, болезнь Гревса , болезнь Иценко-Кушинга - сопровождаются тяжелыми метаболическими расстройствами, в то числе и обмена углеводов.

Нарушения обмена углеводов наблюдаются при заболеваниях печени, кишечника, почек и др. органов. - 6 - 4.3.1. Наследственные или первичные нарушения обмена углеводов 4.3.1.1. Непереносимость лактозы К настоящему времени известны десятки наследственных болезней причинами которых являются нарушения синтеза того или иного фермента углеводного обмена. Одним из таких заболеваний является непереносимость лактозы. У людей, страдающих непереносимостью лактозы, в кишечнике не синтезируется фермент лактаза , обеспечивающий в норме расщепление лактозы до глюкозы и галактозы.

Поскольку дисахариды не всасываются, поступившая с пищей лактоза остается в просвете кишечника, где она разлагается под действием микрофлоры.

Образуется много различных продуктов микробного расщепления лактозы, в том числе и газообразных. Из-за повышения осмотического давления в кишечника жидкость из крови уходит в просвет кишечника, следствием чего могут быть понос или рвота, у детей развивается дегидратация, которая ими переносится крайне тяжело.

Одновременно развивается метеоризм. В кровь из кишечника поступают токсичные продукты микробного расщепления галактозы, например, ряд альдегидов. Кроме того, для маленьких детей существенное значение имеет недостаточное поступление в организм углеводов, поскольку при грудном вскармливании лактоза является практически единственным углеводом их пищи.

Интересно, что синтез лактазы может быть нарушен у взрослых, хотя в детском возрасте нарушений усвоения лактозы у них не было.

Трудности в усвоении лактозы встречаются примерно у 20% взрослого населения Европы и примерно у 80 % африканцев или индейцев. Все неприятные симптомы исчезают при удалении лактозы из пищи, но для грудных детей это означает переход на искусственное вскармливание. 4.3.1.2. Галактоземия Значительно опаснее для детей раннего возраста нарушение усвоения моносахарида галактозы -- так называемая галактоземия. У таких детей в крови повышено содержание галактозы, этот моносахарид выделяется также с мочой.

Причиной развития заболевания является врожденное нарушения синтеза одного из ферментов обмена галактозы. При швейцарском варианте галактоземии у ребенка нарушен - 7 - синтез галактокиназы , отвечающей за фосфорилирование в клетках галактозы.

Галактоза не усваивается и часть её восстанавливается в токсичный для клеток шестиатомный спирт галактитол. При африканском варианте галактоземии у ребенка нарушен синтез фермента гексозо -1- фосфат - уридилтрансферазы , в результате в клетках накапливается галактоза и галактозо-1-фосфат. Их накопление и оказывает токсическое воздействие на клетки.

Африканский вариант галактоземии более тяжелый: вероятно дело в том, что накапливающийся при этом варианте галактозо-1-фосфат, как и любой другой фосфорный эфир моносахаридов, не способен выходить из клеток, тогда как свободная галактоза, накапливающаяся в организме при швейцарском варианте, свободно покидает клетки и легко выводится с мочой. При галактоземии признаки заболевания появляются уже через несколько дней после начала кормления: появляются тошнота, рвота, дегидратация, желтушность, позднее присоединяются гепатоспленомегалия и поражение почек. Для больных детей характерны задержка умственного и физического развития, раннее появление катарактыпомутнения хрусталика.

Лечение - перевод на диету, не содержащую галактозы.

Интересно, что у детей с африканским вариантом галактоземии к примерно годовалому возрасту в печени начинается синтез фермента галактозо-1-фосфатуридилтрансферазы и усвоение галактозы постепенно улучшается, но к этому времени в организме ребенка уже развивается ряд необратимых изменений.

Поэтому лишь своевременная диагностика галактоземии позволяет спасти ребенка. 4.3.1.3. Наследственная непереносимость фруктозы Наследственная непереносимость фруктозы может быть вызвана отсутствием ферментов фруктокиназы или фруктозо -1- фосфатальдолазы . При отсутствии фруктокиназы обычно кроме повышения концентрации фруктозы в крови и появления её в моче после приема пищи, содержащей фруктозу, других последствий не бывает.

Однако при недостаточности фруктозо-1-фосфатальдолазы после приема пищи, содержащей фруктозу,могут возникнуть боли в животе, рвота, диаррея, возможны кома и судороги. При продолжающемся приеме пищи, содержащей фруктозу развиваются тяжелые поражения печени и почек.

Естественно, при лечении такого больного в первую очередь из пищи нужно убрать - 8 - продукты, содержащие фруктозу, в том числе исключить сахарозу.

Отмечено, что дети, имеющие этот генетический дефект, сами избегают приема сладостей. 4.3.1.4. Гликогеновые болезни Гликогеновые болезни связаны с наследственными,т.е. генетически обусловленными нарушениями метаболических путей синтеза или распада гликогена. Могут наблюдаться или избыточное накопление гликогена в клетках гликогеноз, или отсутствие (пониженное содержание) гикогена в клетках агликогеноз. При гликогенозах в результате отсутствия одного из ферментов, участвующих в расщеплении гликогена, гликоген накапливается в клетках, причем избыточное накопление гликогена приводит к нарушению функции клеток и органов. В некоторых случаях дефектным является один из ферментов синтеза гликогена, в результате в клетках накапливается гликоген с аномальной структурой, который расщепляется медленнее и в результате он накапливается в клетках.

Гликогенозы могут быть локальными, в этом случае гликоген накапливается в каком-либо одном (иногда двух) органе, но они могут быть и генерализованными, в таком случае гликоген накапливается в клетках многих органов.

Известно более десятка гликогенозов, отличающихся друг от друга характером энзимного дефекта.

Примерами могут служить: а) Болезнь Мак-Ардля ( гликогеноз V типа ). Дефектным ферментом у больных является фосфорилаза мышц . Для этих больных характерны мышечная слабость, боли в мышцах при умеренной физической нагрузке.

Гликоген накапливается в миоцитах. б) Болезнь Херса ( гликогеноз V1 типа ). В основе заболевания лежит нарушение активации печеночной фосфорилазы в результате отсутствия, например, киназы фосфорилазы. Для этого гликогеноза характерно накопление гликогена в печени, гепатоспленомегалия. в) Болезнь Андерсена ( гликогеноз 1V типа ). Этот гликогеноз вызван дефектом фермента ветвления в клетках различных органов и тканей, в результате чего в клетках синтезируются длинные полимерные молекулы, напоминающие по структуре амилозу крахмала. Такие молекулы крайне медленно расщепляются фосфорилазой из-за малого количества свободных концов полисахаридных цепей, к кото- - 9 - рым может присоединяться фермент.

Нарушается функция многих органов и тканей. При агликогенозах содержания гликогена в клетках снижено. Самый характерный признак агликогенозов - выраженное снижение содержания глюкозы в крови натощак. В результате этой гипоглюкоземии могут возникнуть судороги, рвота, потеря сознания.

Постоянный недостаток глюкозы для питания мозга часто приводит к задержке умственного развития.

Обычно такие больные погибают в детском возрасте, хотя в принципе частое кормление может существенно ослабить проявление болезни. 4.3.1.5. Лизосомные болезни накопления Углеводные компоненты гликолипидов, гликопротеидов и гликозаминопротеогликанов расщепляютя в лизосомах при участии ферментов кислых лизосомальных гликозидаз , которых в общей сложности насчитывается около 4-х десятков.Врожденный дефект любого из этих ферментов приводит к тому, что расщепление полимерных молекул проходит не до конца и в лизосомах начинают накапливаться продукты неполного расщепления гетероолигоили гетерополисахаридов.

Мембраны лизосом разрываются, что приводит к гибели клеток и нарушению функций тех или иных органов.

Заболевания, развивающиеся вследствие таких генетических дефектов получили название гликозидозов или лизосомных болезней накопления. Среди них различают: а) гликолипидозы, б) гликопротеидозы, в) мукополисахаридозы.

Обычно они называются по фамилиям больных, у которых был впервые установлен дефект того или иного лизосомального фермента.

Например, к мукополисахаридозам относят синдром Моркио ( дефект галак - тозо -6- сульфатазы ) или синдром Гунтера ( дефект идуронатсульфа - тазы ). Эти заболевания отличаются прогрессирующим течением с различной степенью тяжести. Они часто проявляются уже с первых недель или месяцев жизни и обычно сопровождаются резкими нарушениями в развитии ребенка.

Продолжительность жизни больных уменьшена, часто смерть наступает в раннем детском возрасте. В настоящее время медицина не располагает сколь-либо эффективными средствами для лечения лизосомных болезней накопления и - 10 - гликогенозов. И хотя частота гликозидозов не превышает в среднем 1 : 100 000, а частота гликогенозов - 1 : 40 000, в связи с отсутствием эффективных способов лечения эти заболевания составляют серьёзную проблему для медицины.

Важнейшее значение приобретает профилактика, направленная на предотвращение рождение детей, страдающих этими заболеваниями. Это задача медико-генетических консультаций,неспешное развитие которых все же идет в нашей стране. 4.3.2. Вторичные нарушения углеводного обмена Нарушения углеводного обмена, не имеющие наследственного характера, встречаются как результат того или иного заболевания или же как следствие пребывания человека в экстремальных условиях, например, голодание или эмоциональный стресс.

Проявлением этих нарушений метаболизма обычно является изменение содержания глюкозы в крови, появление глюкозы в моче, изменение содержания различных промежуточных продуктов углеводного обмена в крови, моче, спинномозговой жидкости или в тканях.

Измерение содержания этих соединений в тех или иных биологических объектах дает врачу ценную объективную информацию о состоянии внутренней среды организма, на основании которой в комплексе с имеющимися у врача данными, полученными другими методами, может быть поставлен диагноз или сделано заключение о ходе развития патологического процесса. Целый ряд физиологических и патологических состояний сопровождаются изменениями содержания глюкозы в крови.

Напомню, что нормальное содержание глюкозы в крови составляет 3,3 - 5,5 мМ/л или 60 - 100 мг/дл.

Повышение концентрации глюкозы в крови более 5,5 мМ/л носит название гипергликемия , хотя более точно это состояние следовало бы называть гиперглюкоземией.

Причиной гипергликемии может быть то или иное физиологическое состояние организма, но гипергликемия может развиваться и как следствие различных заболеваний.

Физиологические гипергликемии наблюдаются, во-первых , после приема богатой углеводами пищи - это так называемые алиментарные гипергликемии,они являются следствием большого поступления глюкозы в кровь из кишечника ; во-вторых, при эмоциональных стрессах,в этом случае повышение содержания глюкозы в крови вызвано большим - 11 - выбросом адреналина в кровь из мозгового вещества надпочечников и усиленной мобилизацией гликогена в печени под действием это гормона.

Физиологические гипергликемии носят переходящий характер.

Гипергликемии, возникшие на почве патологических состояний , носят, как правило, стойкий характер.

Никогда не следует упускать из виду, что гипергликемия может развиваться при различных патологических состояниях.

Приведем несколько примеров патологических гипергликемий.

Гипергликемия характерна для сахарного диабета. При сахарном диабете или снижена продукция инсулина альфа-клетками поджелудочной железы или же уменьшено число рецепторов для инсулина в клетках инсулинзависимых тканей. В обоих этих случаях, прежде всего, заторможен поступление глюкозы в клетки инсулинзависимых тканей и глюкоза накапливается в крови.

Безусловно, определенную роль играет также нарушение утилизации глюкозы тканями.

Однако, если при снижении продукции инсулина поджелудочной железой заместительная терапия введение инсулина дает хороший эффект, то при нарушении работы рецепторного аппарата клеток терапия сопряжена с многими трудностями. При так называемом стероидном диабете также развивается стойкая гипергликемия. В основе этого варианта гипергликемии лежит избыточная продукция гиперплазированным корковым веществом надпочечников гормонов глюкокортикоидов.

Глюкокортикоиды, поступающие в кровь в избыточном количестве, вызывают гиперстимуляцию глюконеогенеза, отсюда и гипергликемия.

Гиперплазия коры надпочечников наблюдается при болезни или синдроме Иценко-Кушинга. При опухолях, происходящих из так называемых хромафинных клеток, например, при опухолях мозгового вещества надпочечников, также развивается гипергликемия, причиной которой является избыточная продукция опухолевыми клетками гормона адреналина. Еще одним вариантом патологической гипергликемии является гипергликемия, развивающаяся при тяжелых поражениях печени. В этом случае причиной гипергликемии является нарушение способности пораженной печени депонировать поступающую во время пищеварения из кишечника глюкозу в виде гликогена.

Гипергликемии встречаются и при других патологических состояниях, таких как тиреотоксикозы, поражения центральной нервной системы и др. - 12 - Гипергликемия может сопровождаться глюкозурией , т.е. появлением глюкозы в моче. В норме содержание глюкозы в моче настолько незначительно, что с помощью обычных химических методов, используемых в практике клинических лабораторий (таких как реакции Троммера или Фелинга или пробы с индикаторными бумажками типа 'Глюкотест'), её обнаружить не удается. При здоровых почках глюкоза попадает из крови в мочу только тогда, когда ее концентрация в кро - ви превышает 8,5 - 9,0 мМ/л, т.е. превышает так называемый почеч - ный порог для глюкозы -- максимальную концентрацию глюкозы в плазме крови, при которой она еще полностью реабсорбируется из первичной мочи.

Величина почечного порога лимитируется мощностью механизмов реабсорбции в канальцевом аппарате нефронов. При поражении нефронного аппарата ( тяжелые нефриты, токсические поражения почек и др.) величина почечного порога снижается и тогда глюкоза может появляться в моче даже при её нормальном содержании в крови. Таким образом, причинами глюкозурии могут быть, во-первых, высокий уровень гипергликемии, во-вторых, снижение способности пораженных почек реабсорбировать глюкозу из первичной мочи, что эквивалентно снижению почечного порога для клюкозы . Снижение содержания глюкозы в крови ниже 3,3 мМ/л получило название гипогликемия ( гипоглюкоземия ). Гипогликемия значительно более опасна для человека нежели гипергликемия, так как снижение содержания глюкозы в крови приводит к нарушению энергообеспечения клеток головного мозга, в результате чего могут развиваться потеря сознания, судороги, может наступить смерть.

Причинами гипогликемии могут быть голодание или длительная тяжелая работа,т.е.экстремальные условия, в которых оказался человек.

Естественно, что эти гипогликемии носят временный характер.

Стойкие гипогликемии могут развиваться в результате нарушении деятельности желез внутренней секреции. Так, при бронзовой болезни в результате деструкции коры надпочечников в организме снижается содержание глюкокортикоидов, что приводит к снижению уровня глюконеогенеза и падению содержания глюкозы в крови.

Гипогликемия развивается при гипотиреозах или при инсуломе -- опухоли из бета-клеток поджелудочной железы, сопровождающейся гиперпродукцией инсулина.

Тяжелая, порой опасная для жизни, гипогликемия может развиваться у больных сахарным диабетом при передозировке инсулина, о чем всегда должен помнить лечащий врач. - 13 - 4.4. Исследование состояния углеводного обмена При изучении состояния углеводного обмена у обследуемого в первую очередь необходимо определить содержание глюкозы в крови. Если у обследуемого обнаружена гипергликемия или гипогликемия, необходимо повторное проведение того же исследования, чтобы убедиться в стойком характере гиперили гипогликемии.

Необходимо также проведение анализа мочи на наличие в ней сахара. В ряде случаев необходимо установить химическую природу сахара в моче, поскольку это может быть не только глюкоза, а галактоза или фруктоза.

Вопрос о природе обнаруженного сахара в моче можно решить с помощью поляриметрии и химических методов исследования. 4.4.1. Тест на толерантность к глюкозе При обнаружении устойчивой гипергликемии следует выяснить её причины. Для этого наряду с общеклиническим обследованием больного можно использовать тесты на толерантность к глюкозе или галактозе. При проведении теста на толерантность к глюкозе ( т.е. способности организма усваивать глюкозу ) обследуемому определяют содержание глюкозы в крови натощак. Далее дают внутрь определенное количество глюкозы, обычно 1 г на 1 кг массы тела, а затем при классическом варианте теста через каждые 15 минут на протяжении 2 часов определяют содержание глюкозы в крови. У здорового человека максимальный подъем содержания глюкозы в крови после нагрузки глюкозой или сахарозой наступает через 30 - 45 минут после приема сахара, причем уровень глюкозы в крови не превышает почечного порога для глюкозы.

Содержание глюкозы в крови возвращается к исходному уровню через 2 часа после приемы сахара. У больных сахарным диабетом наблюдается быстрый и значительный подъем содержания глюкозы в крови, причем содержание глюкозы зачастую превышает почечный порог. У этих больных через 2 часа после приема сахара содержание глюкозы в крови не возвращается к исходному уровню.

Следует помнить, что при тяжелых поражениях печени также наблюдается крутой подъем содержания глюкозы в крови после нагрузки, что является следствием нарушения депонирующей функции печени, однако у таких больных через 2 часа содержание - 14 - глюкозы в крови обычно возвращается к исходному уровню, так как поступившая в кровь глюкоза успевает за этот срок перейти в клетки периферических тканей. У больных с тяжелыми поражениями кишечника наблюдается медленный и незначительный подъем содержания глюкозы в крови из-за медленного всасывания глюкозы. В то же время спустя 2 часа после приема сахара содержание глюкозы в крови может и не возвратиться к исходному уровню из-за продолжающегося медленного всасывания глюкозы из кишечника. Таким образом, результаты теста на толерантность к глюкозе требуют серьезного их анализа в сопоставлении с другими имеющимися клиническими данными. Для оценки результатов те6ста на толерантность к глюкозе иногда используется расчет коэффициента Бодуэна по формуле: В - А К.Б.= --------- х 100% , где А 'B'-максимальное содержание глюкозы в крови после нагрузки; 'A'- содержание глюкозы в крови натощак. У здоровых людей значение коэф.Бодуэна составляет 50-60%. Считается: если значение коэф.

Бодуэна превышает 80 %, то у обследуемого имеется нарушение работы инсулярного аппарата. 4.4.2. Тест на толерантность к галактозе При подозрении на патологию печени можно использовать тест на толерантность к галактозе.

Обследуемому натощак дают 40 г галактозы и собирают мочу в течение 4-5 часов. У здорового человека за этот период выделяется не более 3 - 4 г галактозы с мочей.

Содержание галактозы в моче можно определить методом поляриметрии. При патологии печени нарушается перевод галактозы в глюкозу, в результате выделение галактозы с мочой увеличивается. При малейшем подозрении на галактоземию проведение этого теста запрещается. 4.4.3. Другие методы исследования углеводного обмена Для оценки состояния углеводного обмена используется целый ряд методов определения содержания в биологических объектах различных соединений, являющихся промежуточными продуктами метаболизма углеводов. Так, при гипоксических состояниях в тканях накаплива- - 15 - ется лактат, он поступает в кровь и концентрация лактата в крови повышается.

Одновременно в крови снижается концентрация пирувата.

Нормальное содержание лактата в крови составляет 0,5 - 2,2 мМ/л , пирувата -- 0,034-0,100 мМ/л.

Накопление лактата в крови приводит к развитию лактат-ацидоза, компенсированному или декомпенсированному. При декомпенсированном лактат-ацидозе происходит сдвиг рН крови в кислую сторону, что сопровождается дезорганизацией работы ферментных систем в организме. Это угрожающее жизни состояние.

Тяжелый лактат-ацидоз может быть при шоке, он может развиваться и при других патологических состояниях.

Интенсивность расщепления гликозаминогликанов в организме может быть оценена по количественному содержанию продуктов их распада в моче. В норме их содержание, рассчитанное на основе количественного определения содержания уроновых кислот в моче, составляет 5 - 10 мг в сутки. При коллагенозах, например при ревматизме или ревматоидном артрите, сопровождающихся деструкцией соединительной ткани, их содержание в моче может достигать 0,5 г в сутки, причем в целом оно пропорционально тяжести патологического процесса. При диагностике наследственных нарушений обмена углеводов большое значение имеет определение активности различных ферментов углеводного обмена. Так, при диагностике лизосомных болезней накоплений обычно определяют активность кислых лизосомальных гликозидаз в фибробластах кожи, а при диагностике гликогеновых болезней - определение активности ферментов, принимающих участие в синтезе или распаде гликогена, в биоптатах тканей.

Проведение этих исследований требует хорошей оснащенности лабораторий и наличия грамотного персонала, в том числе и врачей, владеющих как биохимическими методами исследования, так и способных оценить полученные результаты, что не менее важно, чем само проведение тех или иных биохимических тестов.